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[发明专利]乙型肝炎疫苗及其生产方法-CN202310082311.6在审
发明人：邹烨宁;赵冉;白迅;孟凡红;董高峰;张立志;薛晨宝;李研;胡雅灵;高强;尹卫东 -专利权人：北京科兴中维生物技术有限公司
申请日： 2023-01-19 - 公布日： 2023-06-02 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本公开涉及一种诱导乙肝表面抗原表达的方法、乙肝表面抗原纯化的方法、生产乙型肝炎疫苗的方法和乙型肝炎疫苗。该诱导乙肝表面抗原表达的方法：将表达乙肝表面抗原的酵母进行三级发酵至OD600为100～200时，添加甲醇，诱导乙肝表面抗原表达，收获发酵产物。乙肝表面抗原纯化的方法包括：采用PEG沉降及硅胶吸附对发酵产物初步纯化，得到杂蛋白较少的粗纯液，再通过阴离子交换和凝胶过滤层析进一步纯化获得抗原提取物，并通过硫酸铝钾溶液在位吸附，获得体外效价高的乙肝疫苗。本公开提供的诱导乙肝表面抗原的方法能够提高乙肝表面抗原的产量；对乙肝抗原的纯化的方法，提高了抗原回收率，缩短了生产时间，有利于工艺放大生产。
乙型肝炎疫苗及其生产方法

[发明专利]一种毕赤酵母突变菌及其在蛋白质谷氨酰胺酶生产中的应用-CN202111438249.7在审
发明人：李宾;程斯达;康丽华;张静静;郭瑞 -专利权人：青岛蔚蓝生物集团有限公司
申请日： 2021-11-30 - 公布日： 2023-06-02 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程技术领域，具体提供了一种毕赤酵母突变菌及其在蛋白质谷氨酰胺酶生产中的应用。申请人通过基因工程手段和紫外诱变筛选获得一株蛋白质谷氨酰胺酶产量明显提高的突变菌，其保藏编号为CCTCC NO：M20211205。所述突变菌可以广泛应用于蛋白质谷氨酰胺酶的生产，有利于降低该酶的生产成本，促进其广泛应用。
一种酵母突变及其蛋白质谷氨酰胺生产中的应用

[发明专利]一种制备重组人奥克纤溶酶原的制备方法-CN202210051760.X有效
发明人：彭红卫;汪露 -专利权人：景泽生物医药（合肥）股份有限公司;上海景泽生物技术有限公司;成都景泽生物制药有限公司
申请日： 2022-01-17 - 公布日： 2023-06-02 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明提供了一种制备重组人奥克纤溶酶原的方法，属于发酵领域。该方法包括以下步骤：(1)种子活化与扩增：将表达重组纤溶酶原的毕赤酵母工程菌活化，扩增，得到种子液；(2)发酵：将种子液接种至发酵培养基，进行发酵培养，当发酵液中细胞湿重大于等于180g/L，同时溶解氧大于等于100％时，加入诱导剂进行诱导，同时加入由质量比为1：(1～4)的酵母粉和蛋白胨组成的氮源，诱导表达35～75小时，终止发酵；(3)收集发酵上清，分离提纯得到重组纤溶酶原。本发明的发酵工艺不仅能够显著提高重组人奥克纤溶酶原的表达量，还能明显减少重组人奥克纤溶酶原的降解，有效提高蛋白的产量，适合工业化生产。
一种制备重组人奥克纤溶酶原方法

[发明专利]一种提高酿酒酵母合成熊果酸和齐墩果酸产量的方法-CN202310107825.2在审
发明人：刘龙;陈坚;石训;吕雪芹;石勇;堵国成;李江华;刘延峰;金柯;党连魁 -专利权人：江南大学;好想你健康食品股份有限公司
申请日： 2023-02-14 - 公布日： 2023-05-30 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种提高酿酒酵母合成熊果酸和齐墩果酸产量的方法，具体涉及采用重组酿酒酵母进行发酵生产，该重组酿酒酵母至少表达了香树脂醇合酶CrMAS、香树脂醇C‑28位氧化酶CrAO和细胞色素‑NADPH‑还原酶AtCPR1，敲除了苹果酸合酶MLS1，并强化表达了醇脱氢酶ADH2、乙酸盐‑辅酶A连接酶1ACS1、醛脱氢酶ALD6、鲨烯环氧酶ERG1以及香树酯醇合酶CrMAS。
一种提高酿酒酵母合成果酸产量方法

[发明专利]合成白藜芦醇的解脂亚洛酵母菌株及其应用-CN202211652095.6在审
发明人：周景文;刘孟粟;陈坚;曾伟主;宁扬;余世琴 -专利权人：江南大学
申请日： 2022-12-21 - 公布日： 2023-05-30 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了合成白藜芦醇的解脂亚洛酵母菌株及其应用，属于基因工程和生物工程技术领域。本发明首先获得了一株能够异源生产对香豆酸的解脂亚洛酵母重组菌株，通过游离质粒表达筛选不同的融合标签和连接肽长度融合表达Pc4CL1和VvSTS，以及利用不同启动子强度筛选出最优的白藜芦醇产量。最终，将最优的组合定点整合至基因组上以及增加一个融合基因拷贝数，在解脂亚洛酵母中实现了白藜芦醇的高效合成，使摇瓶产量达到201±3.3mg/L。本发明将植物异源代谢途径整合到解脂亚洛酵母实现了白藜芦醇的生产，为后续的黄酮类化合物生物合成奠定了基础，对于合成生物学的发展具有潜在的价值和意义。
合成藜芦解脂亚洛酵母菌株及其应用

[发明专利]7-DHC出胞分泌合成的酿酒酵母基因工程菌及其构建与应用-CN202310058515.6在审
发明人：柳志强;柯霞;潘子豪;杜宏斐;郑裕国 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2023-01-18 - 公布日： 2023-05-30 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明涉及一种7‑DHC出胞分泌合成的酿酒酵母基因工程菌株，及其构建方法和应用。本发明构建了一株可向胞外高效转运7‑DHC的重组S.cerevisiae菌株sc13，利用其进行500mL摇瓶双相发酵时，7‑DHC总产量达到28.189mg/g(分泌量11.701mg/g)，相较于对照sc1菌株，7‑DHC总产量提升14.54倍，胞外总分泌量提升13.77倍，其中胞外7‑DHC的分泌产量占比41.51％。由本发明构建的重组菌株具有更强的外分泌能力和更高的产量，对7‑DHC的合成以及简化7‑DHC的分离提取提供了指导思路，具有广阔的应用前景。
dhc 分泌合成酿酒酵母基因工程及其构建应用

[发明专利]一种高产赤藓糖醇的基因工程菌、构建方法及应用-CN202211301011.4在审
发明人：柳志强;肖博文;黄良刚;张博;周俊平;郑裕国 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2022-10-24 - 公布日： 2023-05-30 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明涉及一种赤藓糖醇的基因工程菌株及其构建方法，以及其在微生物发酵制备赤藓糖醇中的应用。本发明在解脂耶氏酵母中引入木糖还原酶、木糖醇脱氢酶以及木糖醇激酶重塑了木糖代谢途径，强化赤藓糖醇生物生成途径中转酮酶TKL1、转醛酶TAL、赤藓糖还原酶ER的表达，通过敲除甘露糖醇脱氢酶MDH和阿拉伯糖醇脱氢酶ArDH来减少副产物甘露糖醇和阿拉伯糖醇的生成，通过敲除赤藓糖醇脱氢酶EYD减少赤藓糖醇转化为其他物质削弱赤藓糖醇的积累，通过强化糖摄取途径基因己糖激酶HK、转运蛋白Stp1和Stp2的表达，最后可利用葡萄糖和木糖混合碳源的赤藓糖醇高产菌，产量从50.17g/L提高到195.56g/L，为以木糖为底物合成赤藓糖醇工业化生产提供了优良菌株来源，具有很好的工业应用潜力。
一种高产赤藓糖基因工程构建方法应用

[发明专利]一种表达右旋糖酐酶的毕赤酵母重组菌株及其应用-CN202310247280.5在审
发明人：史劲松;刘超;龚劲松;许正宏;苏畅;李恒 -专利权人：江南大学
申请日： 2023-03-15 - 公布日： 2023-05-30 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种表达右旋糖酐酶的毕赤酵母重组菌株及其应用。本发明通过系统改造启动子、信号肽及共表达分子伴侣，成功实现了高水平胞外表达右旋糖酐酶，胞外酶活达到159.68U/mL，相较于未改造的出发菌株，酶活提高了2.1倍。进一步通过5L罐上放大发酵，酶活力达到了3257.23U/mL。
一种表达右旋糖酐酵母重组菌株及其应用

[发明专利]一种高产丙酮酸的解脂耶氏酵母工程菌WSMHP、构建方法及应用-CN202210949668.5在审
发明人：袁围;李清清;刘梦珠;王松茂;李玲秀;杜永保;魏立天;史玉娜;章银军 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2022-08-09 - 公布日： 2023-05-30 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种高产丙酮酸的解脂耶氏酵母工程菌、构建方法及应用，所述解脂耶氏酵母工程菌WSMHP是将解脂耶氏酵母基因组中草酰乙酸转运蛋白编码基因Oac1p敲除，同时过表达丙酮酸脱羧酶编码基因Pyc2和磷酸烯醇丙酮酸羧化激酶编码基因Pck1。本发明提供的解脂耶罗酵母工程菌WSMHP与出发菌株解脂耶罗酵母出发菌株YW100‑1相比，以甘油为唯一碳源时，丙酮酸产量增加了39.0％，达到168.9g/L，为丙酮酸工业化生产提供了优良菌株。
一种高产丙酮酸解脂耶氏酵母工程 wsmhp 构建方法应用

[发明专利]产OPO型结构酯的基因工程菌及其构建方法与应用-CN202211053882.9在审
发明人：刘军锋;杨川;邓利;王芳 -专利权人：北京化工大学
申请日： 2022-08-31 - 公布日： 2023-05-30 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明涉及一种产OPO型结构酯的基因工程菌，其为含有编码硬脂酰辅酶AΔ9去饱和酶的ChDes9‑2基因的重组酵母细胞；具体地，该基因工程菌是通过在酿酒酵母菌株YS58中以编码硬脂酰辅酶AΔ9去饱和酶的ChDes9‑2基因替代了编码Δ9去饱和酶的OLE1基因，并过表达了GAT1和/或SLC和/或PAP和/或DGAT基因构建获得，其有效地提高了酿酒酵母中OPO型结构酯在酿酒酵母体内的油脂的占比，使酿酒酵母基因工程菌的OPO型结构酯在甘油三酯中的含量达到17.2％，突破了OPO型结构酯来源的局限性。
opo 结构基因工程及其构建方法应用

[发明专利]高表达DNase I的重组毕赤酵母菌、构建方法及应用-CN202210791988.2在审
发明人：薛亚平;沈其;郑裕国 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2022-07-05 - 公布日： 2023-05-30 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明涉及一种高表达DNase I的重组毕赤酵母菌及其构建方法与应用。本发明DNase I的表达系统，包括宿主细胞和转化入宿主细胞的表达载体，所述表达载体包括插入有DNase I的第一表达载体和插入有分子伴侣的第二表达载体，所述宿主细胞为毕赤酵母GS115。本发明的有益效果主要体现在：(1)DNase I酶可以降解宿主的DNA，因此对表达宿主有一定的毒性。毕赤酵母可以采用分泌表达的形式将合成的DNase I蛋白运输到胞外，减少DNase I对宿主的毒性，从而提高DNase I的体积表达量。(2)毕赤酵母本身分泌的蛋白比较少，因此如果目的蛋白能有效表达，下游纯化过程将会较为简单。(3)采用PCI共表达的方法，显著提高了DNase I的产率，由于PCI采用胞内表达的形式，不会被分泌到胞内，因此不会影响培养基中DNase I蛋白的纯化步骤。
表达 dnase 重组酵母菌构建方法应用

[发明专利]一种高甲醇耐受的毕赤酵母菌株的构建及其应用-CN202211381199.8有效
发明人：高乐;吴信;孟娇 -专利权人：中国科学院天津工业生物技术研究所
申请日： 2022-11-06 - 公布日： 2023-05-30 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开一种高甲醇耐受的毕赤酵母菌株的构建及其应用，具体涉及参与毕赤酵母细胞壁O‑糖基化修饰的蛋白及其应用。对毕赤酵母敲除该蛋白的编码基因可以直接影响甲醇代谢、转化效率、生长以及异源蛋白质的分泌。该基因敲除后对毕赤酵母菌株表达中性纤维素酶的分泌表达有促进作用，其细胞壁对SDS和刚果红等敏感性降低，对甲醇环境的耐受性明显提升；毕赤酵母细胞壁组成发生重排，甲醇菌体干重和粗蛋白含量均提高20%左右。基于此，本发明创制了高分泌量、高甲醇耐受且高菌体蛋白的巴斯德毕赤酵母菌株。
一种甲醇耐受酵母菌株构建及其应用

[发明专利]一种利用重组解脂耶氏酵母合成对羟基苯甲醇的方法-CN202211606216.3在审
发明人：顾洋;李昌凡;薛锋;黄和 -专利权人：南京师范大学
申请日： 2022-12-14 - 公布日： 2023-05-26 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明属于微生物发酵技术领域，提供了一种利用重组解脂耶氏酵母合成对羟基苯甲醇的方法，通过引入外源的羧酸还原酶基因，促进对羟基苯甲醇在微生物细胞的胞外合成与积累，有效的提高了对羟基苯甲醇的产量，为代谢工程改造高效生产对羟基苯甲醇奠定了基础，为对羟基苯甲醇微生物发酵生产提供了更优的潜在选择。
一种利用重组解脂耶氏酵母成对羟基甲醇方法

[发明专利]一株生产类母乳脂肪的酿酒酵母菌株及其构建方法与应用-CN202211084252.8在审
发明人：刘龙;陈坚;吕雪芹;吴文扬;堵国成;李江华;周国霖;刘延峰;张晨阳 -专利权人：江南大学;内蒙古蒙牛乳业（集团）股份有限公司
申请日： 2022-09-06 - 公布日： 2023-05-26 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明涉及一株类母乳脂肪组成的酿酒酵母菌株及其构建方法与应用。本发明所述酿酒酵母工程菌以酿酒酵母为宿主菌，通过敲除自身天然的脂肪酸去饱和酶和将异源脂肪酸去饱和酶整合表达至所述宿主菌，同时强化脂肪酸合成前体乙酰辅酶A合成途径，得到所述酿酒酵母工程菌。本发明通过对脂肪酸合成途径的相关基因进行强化，以达到高产类母乳脂肪酸组成脂肪酸的效果，使得酿酒酵母生产的脂肪酸组成接近于母乳，主要为C16:0,C18:1和C18:2的比例。
生产母乳脂肪酿酒酵母菌株及其构建方法应用

[发明专利]一种高产肌醇酿酒酵母工程菌的构建方法-CN202010652543.7有效
发明人：赵伟;段莹莹;何庆;杨倩;王健;张雷达 -专利权人：山东福洋生物科技股份有限公司
申请日： 2020-07-08 - 公布日： 2023-05-26 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种高产肌醇酿酒酵母工程菌的构建方法，属于生物工程技术领域。本发明公开的一种高产肌醇酿酒酵母工程菌的构建方法，首先敲除酿酒酵母BY4741中的肌醇生物合成转录抑制子基因opi1，再进一步敲除pgi1基因和zwf1基因，阻断糖酵解和戊糖磷酸途径，同时过表达肌醇‑3‑磷酸合成酶基因ino1，构建了生物安全性的产肌醇基因工程菌株。该工程菌株利用蔗糖作为碳源，分解形成的果糖用于自身的生长代谢，而葡萄糖用于生产肌醇。本发明工程菌株摇瓶水平肌醇产量可达5.65g/L，采用高密度发酵培养方法，在15L发酵罐中肌醇产量可达41.7g/L，对于肌醇的工业化生产具有重要的应用意义。
一种高产酿酒酵母工程构建方法