[发明专利]一种护骨胶囊制何首乌二苯乙烯苷成分的检测方法

说明书

本发明属于中药制剂检测技术领域，具体涉及一种护骨胶囊制何首乌二苯乙烯苷成分的检测方法。发明提供的护骨胶囊制何首乌二苯乙烯苷成分的检测方法是采用高效液相色谱方法进行检测，流动相为乙腈‑水(15:85)，检测波长为320nm，流速为1.0mL/min，柱温为30℃，进样量为10μL。本发明提供的护骨胶囊制何首乌二苯乙烯苷成分的检测方法操作简单，且具有良好的线性关系，精密度、稳定性和重复性，加样回收率高，检测结果准确、可靠，满足国家药品标准要求。

技术领域

本发明属于中药制剂检测技术领域，具体涉及一种护骨胶囊制何首乌二苯乙烯苷成分的检测方法。

背景技术

近年来，中药安全问题，主要来自两方面：第一，掺杂掺假，即用廉价药材代替高价药材，或未按中药组方要求的比例配制；第二，药代动力学过程不明，即所用药材有效成分不明、组分不明、不良反应未明，是中药难以融入现代医学体系的重要原因。传统的中药品质研究有“四大鉴别法”，即：基原鉴别、性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别，随着分析技术的发展和对中药不断深入的研究，中药指纹图谱应运而生，它是目前能够为国内外广泛接受的一种中药质量评价模式，其中薄层扫描(TLCS)、高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)已成为公认的三种常规分析手段。

然而，中药指纹图谱研究主要是针对单味药材提取而言，在植物制剂的整体性作用和药效相关性方面缺乏理论依据和相应的理论指导，并不适用于中成药的质量评价。

中药何首乌特有成分为二苯乙烯苷类(CAS:82373-94-2)，何首乌中已发现的二苯乙烯苷包括2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(简称二苯乙烯苷)、2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2,3-二-O-β-D-葡萄糖苷(即何首乌丙素)、2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-(6”-O-α-D-吡喃葡萄糖)-β-D-吡喃葡萄糖苷、2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-O-(6”-O-乙酰基)-β-D-葡萄糖苷等。中华人民共和国药典将二苯乙烯苷作为检测何首乌的定量指标，在《中国药典》2020年版一部制何首乌质量标准中规定二苯乙烯苷含量不得低于0.70％。

中药护骨胶囊由制何首乌、淫羊藿、熟地黄、龟甲、巴戟天、杜仲、续断、骨碎补、当归、山药等中药材制成，具有补肾益精之功。制何首乌为方中君药，成分占比较大，2,3,5,4ˊ-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷(以下简称二苯乙烯甘)为制何首乌中有效成分之一。原标准中无二苯乙烯苷含量的测定，为了进一步提高护骨胶囊的中药材质量，满足相关规范的要求。寻找一种快速、便捷、稳定、可靠的护骨胶囊中二苯乙烯苷成分含量测量方法是十分有必要的。

发明内容

为解决现有技术中的缺陷，本发明提供了一种护骨胶囊制何首乌二苯乙烯苷成分的检测方法。该护骨胶囊制何首乌二苯乙烯苷成分的检测方法是采用高效液相色谱方法进行检测，流动相为乙腈-水，检测波长为320nm，流速为1.0mL/min，柱温为30℃，进样量为10μL，具有专属性强、精密度高、稳定性好和重复性好的优点，满足国家药品标准要求。

本发明提供了一种护骨胶囊制何首乌二苯乙烯苷成分的检测方法，包括以下步骤：

S1对照品溶液的制备：取2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品，加体积比为50％的甲醇制成每1mL含二苯乙烯苷0.2mg的溶液，得对照品溶液；

S2供试品溶液的制备：取护骨胶囊内容物0.4g至于圆底烧瓶中，精密加入体积比为50％的甲醇25mL，密塞，称定重量，水浴加热回流30～40min，放至室温，称定重量，用体积比为50％的甲醇补足减失重量，摇匀，静置，上清液滤过，取续滤液，得供试品溶液；

S3液相色谱仪检测：

精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，即得。