[发明专利]含有人脐带间充质干细胞冻干粉的抑菌水凝胶的制备方法

说明书

本发明涉及一种含有人脐带间充质干细胞冻干粉的抑菌水凝胶的制备方法。该制备方法为：首先培养孵育人脐带间充质干细胞，收集其上清液冷冻干燥得干细胞冻干粉；再从冻干石莼粉中提取石莼聚糖，氧化得到双醛化石莼聚糖，随后通过壳聚糖与双醛化石莼聚糖发生席夫碱反应，并引入多巴胺，然后制备银纳米颗粒，构建得到双醛化石莼聚糖/壳聚糖/多巴胺/银纳米颗粒复合水凝胶；最后将人脐带间充质干细胞冻干粉溶于磷酸盐缓冲液中得到干细胞冻干粉溶液，并对双醛化石莼聚糖/壳聚糖/多巴胺/银纳米颗粒复合水凝胶进行一定时间的浸泡处理即可。本发明复合水凝胶体系可抑制细菌，防止伤口感染，可促进伤口加速愈合；且具有良好的吸水溶胀性能以及保湿性。

一、技术领域：

本发明涉及水凝胶的制备技术领域，具体涉及一种含有人脐带间充质干细胞冻干粉的抑菌水凝胶的制备方法。

二、背景技术：

人体皮肤是具有抵御外部微生物入侵、避免体液流失和维持机体内部环境稳定等功能的第一道天然屏障。然而，皮肤在遭受手术、烧伤、皮肤病等严重损伤后，这层屏障就会失去其保护作用，最终形成伤口，且容易被大肠杆菌和金黄色葡萄球菌等外界微生物侵入并导致感染，使伤口长时间无法愈合，进而可能会引起很多严重的并发症，如脓毒血症、破伤风以及高烧不退等，严重影响患者的生活质量，甚至威胁患者的生命安全。

伤口敷料通过对伤口进行覆盖，可以起到暂时的保护作用，同时营造利于伤口愈合的环境，避免发生细菌感染。传统的伤口敷料如纱布、绷带和棉花等，可以吸收伤口渗出液以维持干燥环境，是目前在临床上仍然被广泛应用的一种敷料，但这类敷料具有易撕扯伤口、易造成二次损伤、更换时疼痛感强、屏障保护作用差等缺点。为了达到良好的护理伤口的效果，人们着手开发新的伤口敷料。

新型敷料如薄膜、泡沫、纤维和水凝胶等，具有保持伤口湿润、维持细胞增殖所需养分的运输、不与伤口粘连、可加速伤口愈合和基本没有异物感等优势，使其逐渐取代传统敷料，成为目前人们热衷于研究的新型产品。但与此同时，这些新型敷料并不是完美的，例如：

薄膜敷料吸收渗液的能力较差，不适用于高渗出量的伤口；

泡沫敷料不具有粘性，因此需要其它具有粘性的二级敷料来固定，且外观不透明，不利于实时观察伤口愈合情况；

纤维敷料也不具有粘性且无止血功能等。

水凝胶是新型敷料中较为理想的一种，它所具有的三维立体多孔结构与外细胞基质十分类似，可以使其在保持伤口湿润的同时浓缩血小板以及红细胞，起到一定的凝血作用，且不易对伤口进行撕扯，减轻更换时所造成的疼痛和二次损伤；此外，其多孔结构还可以维持氧气渗透，并可以负载药物以及细胞生长因子等物质，促进成纤维细胞的增殖，以加速伤口的愈合；最后，水凝胶具有一定延展性，被任意塑造成各种形状后可与创面形状匹配，并充分地对创面进行粘附、覆盖以及固定，以减少细菌的入侵。

然而目前现有的水凝胶敷料，均存在抑菌效果差以及不能促进伤口快速愈合等缺点，不足以为伤口提供有效的愈合环境，因此理想的水凝胶敷料的开发应用仍是一个巨大的挑战,需要在长期的研究和临床试验中继续探索。

三、发明内容：

本发明为了解决上述背景技术中的不足之处，提供一种用于促进伤口愈合的含有人脐带间充质干细胞冻干粉的抑菌水凝胶的制备方法，该方法制备的水凝胶具有良好的抑菌性能以及促进伤口愈合的功能，可以为伤口愈合提供较为理想的湿润环境。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：含有人脐带间充质干细胞冻干粉的抑菌水凝胶的制备方法，其特征在于：方法步骤为：

1)将0.01～0.05M盐酸溶液与冻干石莼粉混合加热提取石莼聚糖，然后加入高碘酸钠对其进行氧化得到双醛化石莼聚糖，随后通过壳聚糖与双醛化石莼聚糖发生席夫碱反应，并加入多巴胺盐酸盐，构建得到双醛化石莼聚糖/壳聚糖/多巴胺水凝胶基质；