[发明专利]含有人脐带间充质干细胞冻干粉的抑菌水凝胶的制备方法

权利要求书

1.含有人脐带间充质干细胞冻干粉的抑菌水凝胶的制备方法，其特征在于：方法步骤为：

1)将0.01～0.05M盐酸溶液与冻干石莼粉混合加热提取石莼聚糖，然后加入高碘酸钠对其进行氧化得到双醛化石莼聚糖，随后通过壳聚糖与双醛化石莼聚糖发生席夫碱反应，并加入多巴胺盐酸盐，构建得到双醛化石莼聚糖/壳聚糖/多巴胺水凝胶基质；

2)配制0.04～0.08M的硝酸银溶液，将步骤1)中得到的双醛化石莼聚糖/壳聚糖/多巴胺水凝胶浸泡在配置好的硝酸银溶液中，在黑暗环境下反应15～20min，得到双醛化石莼聚糖/壳聚糖/多巴胺/银纳米粒子水凝胶；

3)对人脐带间充质干细胞在含5％的Ultra GRo-Advanced细胞营养添加剂的MEM培养基中进行培养孵育，当其细胞密度达到80％左右时，用0.9wt％的NaCl溶液洗涤3次，再继续在α-MEM培养基中培养24h，收集其上清液，进行冻干处理，得到人脐带间充质干细胞冻干粉；

4)称取2～3g在步骤3)中得到的人脐带间充质干细胞冻干粉，溶于100mL的磷酸盐缓冲液中得到干细胞冻干粉溶液，并对步骤2)中得到的双醛化石莼聚糖/壳聚糖/多巴胺/银纳米颗粒复合水凝胶进行24h的浸泡处理，得到含有人脐带间充质干细胞冻干粉的抑菌天然多糖水凝胶复合体系。

2.如权利要求1中所述的含有人脐带间充质干细胞冻干粉的抑菌水凝胶的制备方法，其特征在于：在步骤1)中，所述双醛化石莼聚糖和壳聚糖的质量比为1:0.5～1。

3.如权利要求1或2中所述的含有人脐带间充质干细胞冻干粉的抑菌水凝胶的制备方法，其特征在于：在步骤1)中，所述双醛化石莼聚糖和多巴胺盐酸盐的质量比为1:0.5～1。

4.如权利要求3中所述的含有人脐带间充质干细胞冻干粉的抑菌水凝胶的制备方法，其特征在于：在步骤2)中，所述硝酸银溶液浓度为0.04～0.08mol/L。

5.如权利要求4中所述的含有人脐带间充质干细胞冻干粉的抑菌水凝胶的制备方法，其特征在于：在步骤4)中，所述干细胞冻干粉溶液浓度为20～30mg/mL。