[发明专利]一种用于鉴别丝羽乌骨鸡和黑凤鸡屠体的引物、试剂盒及检测方法有效
申请号: | 202110376730.1 | 申请日: | 2021-04-07 |
公开(公告)号: | CN112921105B | 公开(公告)日: | 2022-11-08 |
发明(设计)人: | 许继国;崔芳芳;周敏;杨艳北;贡继尚;李袁飞;朱学农;谭玉文;熊信威;许桥;马荆鄂;盛文涛;饶友生;王樟凤 | 申请(专利权)人: | 南昌师范学院 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12N15/11 |
代理公司: | 北京东方盛凡知识产权代理有限公司 11562 | 代理人: | 张雪 |
地址: | 330032 江西*** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 鉴别 乌骨鸡 黑凤鸡屠体 引物 试剂盒 检测 方法 | ||
1.一种引物在鉴别丝羽乌骨鸡和黑凤鸡屠体中的应用,其中,所述引物的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示;当PCR产物基因序列中对应SEQ ID No.4所示序列的161bp处碱基为C、223bp处碱基为A、347bp处碱基为T、376bp处碱基为A、586bp处碱基为T和593bp处碱基为A时,则待测鸡种为黑凤鸡;当上述位点没有出现上述碱基时,则待测鸡种为丝羽乌骨鸡。
2.一种引物在鉴别黑凤鸡中的应用,其中,所述引物的正向引物的核苷酸序列如SEQID No.1所示,反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示;若所述引物扩增得到如SEQ IDNo.4所示的DNA序列,则待测鸡种为黑凤鸡。
3.一种用于鉴别丝羽乌骨鸡和黑凤鸡屠体的鉴别方法,其特征在于,包括以下步骤:
提取待测鸡种的基因组DNA,采用引物对所述基因组DNA进行PCR扩增,对PCR产物进行基因分型,当PCR产物基因序列中对应SEQ ID No.4所示序列的161bp处碱基为C、223bp处碱基为A、347bp处碱基为T、376bp处碱基为A、586bp处碱基为T和593bp处碱基为A时,则待测鸡种为黑凤鸡;当上述位点没有出现上述碱基时,则待测鸡种为丝羽乌骨鸡;
其中,所述引物的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,反向引物的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示。
4.根据权利要求3所述的鉴别方法,其特征在于,所述PCR产物基因序列采用如SEQ IDNo.3所示的测序引物进行测序。
5.根据权利要求3所述的鉴别方法,其特征在于,所述PCR扩增的扩增体系为:模板DNA2μL,2×Eco Taq PCR SuperMix 10μL,引物0.2μL,水补至体系20μL;
扩增程序为:94℃5min,93℃40s、58℃30s、72℃90s,35个循环,72℃7min。
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