[发明专利]一种用于鉴别丝羽乌骨鸡与黑凤鸡屠体的引物、试剂盒及应用

说明书

本发明公开了一种用于鉴别丝羽乌骨鸡与黑凤鸡屠体的引物、试剂盒及应用，该引物包括：上游引物F：核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；上游引物MF：核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；下游引物R：核苷酸序列如SEQ ID No.3所示；本发明设计的用于鉴别丝羽乌骨鸡和黑凤鸡的引物，可以扩增出不同长度的丝羽乌骨鸡和黑凤鸡基因组DNA，通过凝胶电泳条带，可以非常容易的通过条带长短鉴别丝羽乌骨鸡和黑凤鸡，该方法可以100％准确的判断丝羽乌骨鸡和黑凤鸡屠体，可用于冰鲜鸡市场上丝羽乌骨鸡和黑凤鸡屠体的鉴别或筛选。

技术领域

本发明涉及分子生物技术领域，特别是涉及一种用于鉴别丝羽乌骨鸡与黑凤鸡屠体的引物、试剂盒及应用。

背景技术

丝羽乌骨鸡是江西省泰和县特产，原产于泰和县武山北麓，根据产地又称武山鸡，因具有“丛冠、缨头、绿耳、胡须、丝毛、毛脚、五爪、乌皮、乌肉、乌骨”十大特征以及高营养价值和药用价值而闻名。丝羽乌骨鸡是著名的饮食药用鸡，全身均可入药，骨、肉及内脏均有药用价值，可以配成多种成药和方剂。

但是原种丝羽乌骨鸡，长速慢、产蛋量低，于是商业育种公司以丝羽乌骨鸡以及快长类品种为育种素材，培育了黑凤鸡。黑凤鸡又称黑乌凤鸡、黑丝毛乌鸡，其具有与丝羽乌骨鸡完全相同的十全性状，黑凤鸡屠体与丝羽乌骨鸡屠体外观并无两样，消费者无法区分。基于此，常常有不良商家以屠宰后的快长型黑凤鸡假冒优质的丝羽乌骨鸡。

目前尚没有鉴定丝羽乌骨鸡和黑凤鸡屠体的有效办法。

发明内容

本发明的目的是提供一种用于鉴别丝羽乌骨鸡与黑凤鸡屠体的引物、试剂盒及应用，以解决上述现有技术存在的问题，准确鉴别丝羽乌骨鸡和黑凤鸡屠体。

为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

本发明提供一种用于鉴别丝羽乌骨鸡与黑凤鸡屠体的引物，包括：

上游引物F：核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；

上游引物MF：核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；

下游引物R：核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。

本发明还提供一种包含上述的引物的试剂盒。

本发明还提供一种上述的引物或上述的试剂盒在鉴别丝羽乌骨鸡和黑凤鸡屠体中的应用。

本发明还提供一种上述的引物或上述的试剂盒在鉴别丝羽乌骨鸡中的应用。

本发明还提供一种上述的引物或上述的试剂盒在鉴别黑凤鸡中的应用。

本发明还提供一种用于鉴别丝羽乌骨鸡和黑凤鸡屠体的鉴别方法，包括以下步骤：

(1)提取待测鸡种的基因组DNA；

(2)采用上述的引物对所述基因组DNA进行PCR扩增；

(3)对步骤(2)所得PCR产物进行凝胶电泳分析，根据条带长短进行判定，较长条带，判定为黑凤鸡，较短条带，判定为丝羽乌骨鸡。

进一步地，所述较长条带的长度为542bp，所述较短条带的长度为310bp。

进一步地，所述较长条带的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示，所述较短条带的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示。

进一步地，所述PCR扩增的扩增体系为：2×Eco Taq PCR SuperMix 10μL，引物各0.2L，模板NDA 2μL，去离子水补充至体系20μL。

进一步地，所述PCR扩增的扩增程序为：94℃5min，93℃30s、58℃30s、72℃30s，35个循环，72℃5min。

本发明公开了以下技术效果：