[发明专利]一种用于鉴别丝羽乌骨鸡与黑凤鸡屠体的引物、试剂盒及应用

权利要求书

1.一种用于鉴别丝羽乌骨鸡与黑凤鸡屠体的引物，其特征在于，包括：

上游引物F：核苷酸序列如SEQ ID No.1所示；

上游引物MF：核苷酸序列如SEQ ID No.2所示；

下游引物R：核苷酸序列如SEQ ID No.3所示。

2.包含权利要求1所述的引物的试剂盒。

3.一种权利要求1所述的引物或权利要求2所述的试剂盒在鉴别丝羽乌骨鸡和黑凤鸡屠体中的应用。

4.一种权利要求1所述的引物或权利要求2所述的试剂盒在鉴别丝羽乌骨鸡中的应用。

5.一种权利要求1所述的引物或权利要求2所述的试剂盒在鉴别黑凤鸡中的应用。

6.一种用于鉴别丝羽乌骨鸡和黑凤鸡屠体的鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)提取待测鸡种的基因组DNA；

(2)采用权利要求1所述的引物对所述基因组DNA进行PCR扩增；

(3)对步骤(2)所得PCR产物进行凝胶电泳分析，根据条带长短进行判定，较长条带，判定为黑凤鸡，较短条带，判定为丝羽乌骨鸡；

其中，所述较长条带的长度为542bp，所述较短条带的长度为310bp。

7.根据权利要求6所述的鉴别方法，其特征在于，所述较长条带的核苷酸序列如SEQ IDNo.4所示，所述较短条带的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示。

8.根据权利要求6所述的鉴别方法，其特征在于，所述PCR扩增的扩增体系为：2×EcoTaq PCR SuperMix 10μL，引物各0.2L，模板DNA 2μL，去离子水补充至体系20μL。

9.根据权利要求6所述的鉴别方法，其特征在于，所述PCR扩增的扩增程序为：94℃5min，93℃30s、58℃30s、72℃30s，35个循环，72℃5min。