[发明专利]研究提高训练大鼠或小鼠运动耐力营养因素的实验方法

权利要求书

1.研究提高训练大鼠或小鼠运动耐力营养因素的实验方法，其特征在于：包括以下步骤：

S1、选择实验动物：雄性大鼠或小鼠；

S2、动物实验：取大鼠或小鼠80只，随机分为8个处理组，即对照组、营养因子低剂量组、营养因子中剂量组、营养因子高剂量组、运动训练组、运动训练+营养因子低剂量组、运动训练+营养因子中剂量组、运动训练+营养因子高剂量组，每组10只，饲养室内环境温度维持在20℃～25℃，相对湿度为40％～60％，采用国家标准齿类饲料喂养，自由饮水；

对照组、营养因子低剂量组、营养因子中剂量组和营养因子高剂量组不进行运动训练；在固定的时间向对照组灌服同剂量的生理盐水，营养因子低剂量组、营养因子中剂量组和营养因子高剂量组分别灌服用生理盐水配制的新鲜低、中、高剂量的营养因子溶液；在3个剂量组中，其中一个剂量应相当于人推荐摄入量的5－10倍；

运动训练组、运动训练+营养因子低剂量组、运动训练+营养因子中剂量组、运动训练+营养因子高剂量组在上午分别灌服生理盐水和相应剂量的营养因子溶液；在下午进行3％的负重游泳训练；第1周进行适应性训练，游泳时间从开始的15min在1周之内过渡到60min，以后维持此运动时间，每周6次，共6周；每周测量一次体重，调整营养因子的补充量；

S3、力竭性运动试验：取材前3天让大鼠或小鼠进行负重5％的力竭游泳运动实验，记录为大鼠或小鼠游泳时间(min)；

S4、取材和指标测定：取材在力竭性运动试验后第3天晨进行，2％的戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后，从眼球取血，放入抗凝试管中，轻轻摇匀，测定血红蛋白含量；其余血液放置1h后离心(4000r/min，15min)分离血浆，测定睾酮和皮质酮含量；同时，取大鼠或小鼠新鲜肝脏和小腿三头肌，生理盐水漂洗，滤纸吸干，测定肝糖原和肌糖原含量；

S5、数据处理：采用SPSS22.0软件对完成数据测定的数据进行统计学进行处理，采用双因素方差分析分析补充营养因子和运动训练提高运动耐力的主效应和交互效应，采用多重比较分析无和有训练状态下补充营养因子提高运动耐力的效应及其剂量效应，P＜0.05表示有显著性差异；

S6、结果分析：对小鼠游泳时间、血红蛋白含量、睾酮和皮质酮含量、肝糖原和肌糖原含量进行数据分析：

(1)运动训练和营养因子补充能提高大鼠或小鼠力竭性运动时间，且在运动训练的基础上补充营养因子比单独运动训练更好；

(2)运动训练和营养因子补充能提高大鼠或小鼠安静时血睾酮水平，且在运动训练的基础上补充营养因子比单独运动训练更好；

(3)运动训练和补充营养因子提高大鼠或小鼠安静时肌糖原或肝糖原含量，且在运动训练的基础上补充营养因子比单独运动训练更好；

结果判定：若运动耐力试验和1项以上(含1项)生化指标为阳性，即可以判断该营养因子具有提高运动耐力的作用。

2.如权利要求1所述的研究提高训练大鼠或小鼠运动耐力营养因素的实验方法，其特征在于：步骤S1中，实验动物可选择SD大鼠、Wistar大鼠、ICR小鼠或C57BL/6小鼠。

3.如权利要求1所述的研究提高训练大鼠或小鼠运动耐力营养因素的实验方法，其特征在于：步骤S2中，灌服用生理盐水配制的新鲜低、中、高剂量的营养因子溶液；在3个剂量组中，其中一个剂量应相当于人推荐摄入量的5－10倍。

4.如权利要求1所述的研究提高训练大鼠或小鼠运动耐力营养因素的实验方法，其特征在于：步骤S2中，进行2％-3％的负重游泳训练。第1周进行适应性训练，游泳时间从开始的15min在1周之内过渡到60min，以后维持此运动时间，每周6次，共6周；游泳池为内壁光滑的塑料水桶(70cm×50cm×40cm)，水深为小鼠或大鼠身长的2倍以上，水温31±2℃。

5.如权利要求1所述的研究提高训练大鼠或小鼠运动耐力营养因素的实验方法，其特征在于：步骤S3中，取材前3天将各组大鼠或小鼠进行负重5％的力竭游泳运动实验，记录为大鼠或小鼠游泳时间(min)，力竭标准为大鼠或小鼠沉入水中5s不能上浮到水面(在水中不能游动)，力竭过程中尽量避免大鼠或小鼠溺水死亡。