[发明专利]一种固定化酶及其制备方法与在OPO制备中的应用

权利要求书

1.一种固定化酶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

将磁性载体和脂肪酶分散在磷酸缓冲液中形成反应液，将反应液在20～60℃下反应1～6h，得到所述固定化酶；所述磁性载体为多巴胺修饰的铁酸锌；所述脂肪酶为米黑根毛霉脂肪酶；所述反应液中磁性载体的浓度为0.050～0.150g/mL；所述反应液中脂肪酶的浓度为0.2～1.5mg/mL。

2.如权利要求1所述固定化酶的制备方法，其特征在于，所述磷酸缓冲液的pH值为6～10。

3.如权利要求1所述固定化酶的制备方法，其特征在于，所述磁性载体的制备方法如下：

向Tris-HCl缓冲液中添加多巴胺和铁酸锌得到混合溶液，将混合溶液在25～50℃下反应12～24h，得到所述磁性载体。

4.如权利要求3所述固定化酶的制备方法，其特征在于，所述多巴胺和铁酸锌质量比为1∶0.5～5；所述Tris-HCl缓冲液的pH值为7～9；所述混合溶液中多巴胺的浓度为0.01～0.04g/mL。

5.如权利要求1所述固定化酶的制备方法，其特征在于，所述铁酸锌的制备方法如下：

将铁盐和锌盐加入乙二醇中，再加入聚乙二醇和乙酸钠得到混合液，将混合液于100～220℃水热反应12～24h，得到所述铁酸锌。

6.如权利要求5所述固定化酶的制备方法，其特征在于，所述铁盐为三氯化铁或硝酸铁；所述锌盐为氯化锌或硝酸锌；所述乙酸钠、铁盐和锌盐的摩尔比为6～10∶2∶1；所述聚乙二醇的质量与乙二醇的体积配比为0.02～0.5g/mL。

7.采用权利要求1-6任一项所述固定化酶的制备方法制备的固定化酶。

8.如权利要求7所述的固定化酶的催化合成OPO方法，其特征在于，包括如下步骤：

将底物、固定化酶和正己烷混合均匀，在20-60℃下反应3-18h，得到所述OPO；所述底物为三棕榈酸甘油酯和油酸的混合物。

9.如权利要求8所述固定化酶催化合成OPO的方法，其特征在于，所述三棕榈酸甘油酯和油酸的摩尔比为1：2～10；所述底物和固定化酶的质量比为1：0.04～0.12。