[发明专利]一种钙敏感受体蛋白拮抗剂衍生的分子探针及在甲状旁腺切除手术中的应用

权利要求书

1.一种钙敏蛋白抑制剂衍生的分子探针，其特征在于，具体为手性钙敏蛋白抑制剂拮抗剂Calhex 231衍生的含有如通式A1所示的荧光基团的分子探针或含有如通式A2所示的生色团的分子探针；所述通式A1和通式A2的结构如下所示：

或者

式中，*号碳为手性碳，R₁和R₂可以相同或不同，R₁和R₂为H、-CH₃、-CH₃、X₁和X₂可以相同或不同，X₁和X₂为其中n＝1-12中任一整数。

2.权利要求1所示的分子探针的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)分子探针的母体D，即环己二胺萘胺端的制备方法：

a)环氧环己烷在叠氮化钠的作用下开环，生成2-叠氮环己醇，然后在三苯基膦存在下关环生成7-氮杂二环[4.1.0]庚烷；

b)7-氮杂二环[4.1.0]庚烷在三乙胺和催化量的4-二甲氨基吡啶存在下对7-氮杂二环[4.1.0]庚烷上叔丁氧羰基Boc保护基团；

c)在高氯酸锂催化下，叔-丁基7-氮杂二环[4.1.0]庚烷-7-甲酸基酯与(S)-(-)-1-(1-萘基)乙胺反应开环，生成化合物C，化合物C存在顺、反构型，为RRS构型和SSS构型；通过硅胶层析柱分离，收集SSR构型的化合物C；

d)对SSR构型的化合物C，在盐酸催化下，以二氧六环为溶剂进行叔丁氧羰基的脱除，生成化合物D，此化合物为探针分子的母体；

(2)具有生色团的分子探针的连接子E的制备方法：

e)3-氯-4-羟基苯甲酸乙酯在无水碳酸钾催化下，与N-(2-溴乙基)邻苯二甲酰亚胺反应，向酚羟基上引入邻苯二甲酰亚胺的烷基链，此烷基链可以调节长度，从两个碳到十二个碳；

f)邻苯二甲酰亚胺在水合肼作用下转化为含有氨基的4-(2-氨基乙烷氧基)-3-氯苯甲酸乙酯；

g)对4-(2-氨基乙烷氧基)-3-氯苯甲酸乙酯的氨基进行Boc基团保护；

h)在氢氧化锂的催化下，对Boc基团保护的4-(2-氨基乙烷氧基)-3-氯苯甲酸乙酯进行酯水解，得到化合物E；

(3)具有生色团的分子探针的生色团G的制备方法：

i)N,N-二甲基苯二胺在十八水和硫酸铝，硫代硫酸钠和氯化锌的存在下，重铬酸钾催化下，对N,N-二甲基苯二胺氨基的邻位进行过氧硫代苯磺修饰，生成2-氨基-5-(二乙基氨基)过氧硫代苯磺酸；

j)N-甲基苯胺在2,6-二甲基吡啶和4-溴丁酸乙酯存在下，将二级胺转化为三级胺，并在烷基链一端引入羧酸基团，生成4-((甲基-苯基)氨基)丁酸；

k)2-氨基-5-(二乙基氨基)过氧硫代苯磺酸和4-((甲基-苯基)氨基)丁酸共存的情况下，采用Fetizon试剂催化成环，得到化合物G；

(4)含有如通式A1所示的荧光基团的分子探针以及含有如通式A2所示的生色团的分子探针的制备方法：

化合物D在三乙胺存在下与4-(三氟甲氧基)苯磺酰氯反应，生成通式A1所示的荧光基团的分子探针；其中化合物D:三乙胺:4-(三氟甲氧基)苯磺酰氯的摩尔比例为＝1:0.5～2:1～1.25；

化合物D与化合物E，然后再与化合物G，采用酰胺键生成反应合成，生成通式A2所示的生色团的分子探针，其中化合物D:化合物E:化合物G的摩尔比例为＝1:1.1～1.2:1.1～1.2。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤a)中环氧环己烷:叠氮化钠:三苯基膦的摩尔比例为＝1:2～3:0.7～1.5；步骤b)中7-氮杂二环[4.1.0]庚烷:三乙胺:4-二甲氨基吡啶的摩尔比例为＝1:2～3:0.01～0.05；步骤c)中高氯酸锂:叔-丁基7-氮杂二环[4.1.0]庚烷-7-甲酸基酯:(S)-(-)-1-(1-萘基)乙胺的摩尔比例为＝0.1:1～1.5:1～1.5。