[发明专利]一种常温下保存粪便样本中细菌DNA的保存液

说明书

本发明提供了一种常温下保存粪便样本中细菌DNA的保存液，包括氯化钠、无水乙醇、生物抑菌剂、EDTA二钠和去离子水；保存液中各组分的占比如下：氯化钠0.5‑2mol/L；无水乙醇20‑60％(v/v)；生物抑菌剂0.01‑0.2％(v/v)；EDTA二钠为10‑100mmol/L；余量为去离子水；其中，保存液的PH为7‑8，生物抑菌剂为Proclin 300。本发明能够在常温环境下保证粪便样品中微生物的DNA不被降解，并通过良好的保存性能使粪便样本中微生物的数量、组成和丰度保持稳定，保证肠道菌群测序后数据分析的准确性；本发明实现了粪便样本的常温保存与运输，适用于长距离运输，相较于市场上现有的保存液，具有保存效果好、操作简单、适用性好、无毒害的优点。

技术领域

本发明涉及DNA保存液技术领域，尤其涉及一种常温下保存粪便样本中细菌DNA的保存液。

背景技术

低温冷冻保存是保存粪便样本中微生物最常见的方法，但是低温保存通常需要大型制冷设备，普适性较差，操作复杂，因此通过开发适合微生物保存的DNA保存液显得十分必要。

目前，市场上的DNA保存液中，通常含有异硫氰酸胍等有毒成分，或是成分单一导致样本中的微生物容易污染，微生物的组成和数量发生改变，无法真实反映样本的生物学信息。。

发明内容

为解决上述问题，本发明公开了一种常温下保存粪便样本中细菌DNA的保存液，解决了常温环境下保存粪便样品中微生物DNA的难题，并适用于长距离运输，相较于之前的同类产品保存效果更好、操作方法更简单且无毒性分子，对于保证肠道菌群测序后数据分析的准确性具有益处。

具体方案如下：

采样时将采集到的粪便样本置于粪便保存液中，混匀后常温环境保存，可保证微生物的组成和数量无显著改变。

一种常温下保存粪便样本中细菌DNA的保存液，其特征在于，包括氯化钠、乙醇、生物抑菌剂、EDTA二钠和去离子水。

作为本发明的进一步改进，保存液中各组分的占比如下：

氯化钠的质量比为1mol/L；无水乙醇的体积比为30％(v/v)；生物抑菌剂的体积比为0.1％(v/v)；EDTA二钠的质量比为20mmol/L；余量为去离子水；其中，保存液的PH范围在7-8之间，生物抑菌剂为Proclin 300。

作为本发明的进一步改进，保存液的制备方法为：先将氯化钠和EDTA二钠用去离子水溶解，并用去离子水定容，然后调节pH，在灭菌后加入无水乙醇和生物抑菌剂即得粪便保存液。

本发明的有益效果在于：能够在常温环境下保证粪便样品中微生物DNA不被降解，并通过良好的保存性能稳定粪便样本中微生物的组成和数量无显著改变，保证肠道菌群测序后数据分析的准确性；本发明实现了粪便样本的常温保存与运输，适用于长距离运输，相较于市场上现有的保存液，具有保存效果好、操作简单、适用性好、无毒害的优点。

附图说明

图1为实施例中粪便样本1在不同保存方式下细菌门水平构成比例示意图。

图2为实施例中粪便样本2在不同保存方式下细菌门水平构成比例示意图。

图3为实施例中粪便样本3在不同保存方式下细菌门水平构成比例示意图。

具体实施方式

下面结合附图和具体实施方式，进一步阐明本发明，应理解下述具体实施方式仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。

本发明一种常温下保存粪便样本中细菌DNA的保存液，包括氯化钠、无水乙醇、生物抑菌剂、EDTA二钠和去离子水。

在本实施例中，保存液中各组分的占比如下：