[发明专利]一种人8号染色体着丝粒探针及其制备方法、试剂盒

说明书

本发明涉及一种人8号染色体着丝粒探针及其制备方法、试剂盒，属于分子病理诊断技术领域。本发明的人8号染色体着丝粒探针，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的人8号染色体着丝粒探针，标记效率高，具有较高的特异性，对人8号染色体着丝粒具有良好的识别作用，缓解了现有8号染色体探针标记效率低下的技术问题。本发明还提供一种人8号染色体着丝粒探针的制备方法，该方法简单，容易操作，且制得的人8号染色体着丝粒探针无需纯化，可现标现用。

技术领域

本发明涉及一种人8号染色体着丝粒探针及其制备方法、试剂盒，属于分子病理诊断技术领域。

背景技术

人类的8号染色体是23对染色体的其中之一，正常状况下每个细胞拥有两条。此染色体含有大约155百万个碱基对，占细胞内所有DNA的4.5％到5％。该染色体有两条臂(短臂和长臂：分别命名为8p和8q)。其中较短的8p臂有大约4500万个碱基对，有基因484个，假基因110个，约占总基因组数量的1.5％。这其中8％的基因和神经发育及功能有关，16％的基因和癌症有关，人8号染色体已被证实与韧带样型纤维瘤病、前列腺癌、髓系恶性血液病等疾病有关。8号染色体的计数对一些疾病的治疗和预后判断有重要意义。

目前，对于人8号染色体荧光原位杂交检测所使用的计数探针，多数采用BAC克隆切口平移法标记或标记多条寡核苷酸法。BAC克隆切口平移法的前期要进行菌体活化、摇菌、BAC 克隆提取等复杂的准备工作；标记多条寡核苷酸法，需要对着丝粒特异性较高的多条寡核苷酸分别标记且效率低下。也就是说，采用BAC克隆切口平移法标记和标记多条寡核苷酸法这两种现有常用的方法均费时、费力，且效率低下。

发明内容

本发明的目的在于提供一种人8号染色体着丝粒探针，对人8号染色体着丝粒具有良好的识别作用。

本发明的第二个目的在于提供一种人8号染色体着丝粒探针的制备方法，该方法简单，容易操作，且制得的人8号染色体着丝粒探针无需纯化，可现标现用。

本发明的第三个目的在于提供一种人8号染色体着丝粒探针试剂盒。

本发明的技术方案如下：

一种人8号染色体着丝粒探针，所述人8号染色体着丝粒探针的核苷酸序列如SEQID NO.1所示。

本发明的人8号染色体着丝粒探针，标记效率高，具有较高的特异性，对人8号染色体着丝粒具有良好的识别作用，缓解了现有8号染色体探针标记效率低下的技术问题。

一种人8号染色体着丝粒探针的制备方法，包括以下步骤：

以人基因组DNA为模板，采用PCR反应得到；其中，常规PCR方法所用引物为Chr8-1-F 和Chr8-1-R；引物序列如下：Chr8-1-F：5’-CTCAGAAACATGTTTATGCTG-3’；Chr8-1-R： 5’-CTGCTGTCTACTTTTGATA-3’。

应当理解的是，Chr8-1-F的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，Chr8-1-R的核苷酸序列如 SEQ ID NO.3所示。

本发明的人8号染色体着丝粒探针的制备方法，只需要以人基因组DNA为模板，以Chr8-1-F和Chr8-1-R为引物，采用常规规PCR方法即可得到人8号染色体着丝粒探针。该方法简单，容易操作，且得到的人8号染色体着丝粒探针无需纯化，可现标现用，缓解了现有8号染色体探针制备过程繁琐的技术问题。

优选地，所述常规PCR的体系包括dNTP；所述dNTP为dATP、dGTP、dCTP、dTTP 和荧光素标记的dUTP。