[发明专利]一种定量检测氟喹诺酮类药物的量子点微球免疫层析试纸条

说明书

本发明公开一种定量检测氟喹诺酮类药物的量子点微球免疫层析试纸条，该试纸条包括底板、样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫依次首尾衔接粘贴在底板上，结合垫上包被有量子点微球标记的氟喹诺酮单克隆抗体，硝酸纤维膜上设有包被氟喹诺酮‑BSA复合物的检测线和包被羊抗鼠IgG的质控线。利用该试纸条定量检测氟喹诺酮类药物，检测灵敏度高，高出传统试纸检测2个数量级，检测极限可达到0.05ppb；并且具有良好的线性范围，为0.1ppb‑100ppb；检测特异性可达100％；批次批间差异小，具有良好的重复性；常温可保存一年且灵敏度不降低，具有良好的稳定性；操作简单，成本低廉，适合于现场快速定量检测氟喹诺酮药物。

技术领域

本发明属于食品安全检测技术领域，具体涉及一种定量检测氟喹诺酮类药物的量子点微球免疫层析试纸条。

背景技术

氟喹诺酮(Fluoroquinolones,FQs)是一类新型、高效、广谱的人工合成抗菌药物，被广泛应用于兽药和水产养殖业。由于FQs残留可产生过敏反应、肠道菌群失调、致病菌耐药性和潜在致癌性等威胁人类健康的问题，其在肉、牛奶、蜂蜜等动物源性食品中的残留问题引起广泛关注。为保障食品安全，中国、欧盟等规定了动物源性食品中的FQs最大允许残留限量，对FQs类药物的监测对保障食品安全具有重要意义。

目前，检测FQs常见的方法包括高效液相色谱法(HPLC)、液相色谱-质谱/质谱法(LC-MS/MS)、酶联免疫法(ELISA)等。尽管这些方法可以以高的灵敏度和准确性定量检测FQs，但它们需要昂贵的设备，精通复杂操作的专业人员，并且消耗时间长，从而限制了它们在现场快速检测中的应用。胶体金免疫层析法具有检测快速、成本低、操作方便等优点，因此广泛用于检测FQs类药物，但仍存在一些缺陷，如无法定量检测、检测灵敏度低、基质效应明显背景干扰大等。设计一种定量检测氟喹诺酮类药物的检测装置或方法是本领域亟待解决的技术问题。

本发明设计的量子点微球免疫层析试纸条是以量子点微球作为标记物建立的一种免疫层析方法。量子点激发光谱宽而发射波长窄，荧光效率高，生物兼容性好，量子点微球是一种通过高聚物载体上吸附或包埋量子点而形成的一种标记物，单体量子点微球包裹有数百或者数千的量子点颗粒，因此相较于量子点，具有更高的发光强度，可有效提高检测灵敏度和稳定性。结合手持式荧光检测仪，可实现现场快速定量检测，具有良好的市场前景。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术存在的问题，提供一种检测灵敏度高，稳定性好，可现场定量检测氟喹诺酮类药物的量子点微球试纸条及其制备方法和检测方法。

本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

一种定量检测氟喹诺酮类药物的量子点微球免疫层析试纸条，该试纸条包括底板、样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫依次首尾衔接粘贴在底板上，所述的结合垫上包被有氟喹诺酮单克隆抗体-标记物，所述的硝酸纤维素膜上设有包被氟喹诺酮-蛋白复合物的检测线和包被羊抗鼠IgG的质控线。

作为一种优选技术方案：所述底板的材料为PVC或硬质不吸水的材料；所述样品垫的材料为玻璃纤维、棉纤维、滤纸纤维或聚脂纤维；所述结合垫的材料为玻璃纤维或聚酯纤维；所述吸水垫的材料为吸水滤纸。

作为一种优选技术方案：所述的样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫依次以2-4mm的间距交互层叠首尾粘贴在底板上。

作为一种优选技术方案：所述的标记物为量子点微球、时间分辨荧光微球或者上转换荧光微球；进一步优选的所述量子点微球的粒径范围为50-200nm。

作为一种优选技术方案：所述的检测线上氟喹诺酮-蛋白复合物的用量为0.3-0.8μg/cm；所述的质控线上羊抗鼠IgG的用量为0.5-1.5μg/cm；稀释液为含3％-5％蔗糖的PBS缓冲液。