[发明专利]一种筛选耐低钾烟草品种突变体的方法

说明书

本发明涉及一种筛选耐低钾烟草品种突变体的方法，通过EMS诱变方法收获M1代种子,取1000粒M1代种子，待烟草种子发芽至子叶完全展开时，观察烟草幼苗弯根特性，选出弯根率≥70％的个体；将幼苗移栽进大田中继续进行验证,在大田培养中，绝大多数突变体的长势明显高于对照。本发明以弯根率为筛选指标，从中初筛选出耐低钾突变体材料；并通过田间试验，对其长势和感官指标进行评估，选育出优质耐低钾突变材料，为浓香型优良品种的选育奠定基础。

技术领域

本发明属于烟草选育技术领域，特别是指一种筛选耐低钾烟草品种突变体的方法。

背景技术

植株在生长过程中，钾元素是保证植株生产，抗倒伏的重要元素，但地区不同，土壤中钾含量也不相同，为了避免植株出现倒伏情况，传统的技术是通过施加钾肥来实现，而化肥的大量施加，导致土壤板结，自身系统受到破坏，为了减少对钾肥的使用量，培育出耐低钾烟草是烟草培育领域的重要课题。传统的杂交育种，由于性状连锁，有性杂交难以得到经济性状良好的抗逆、抗病栽培品种，而且常规育种历时长，分化速度迅速，往往超过品种更新换代时间。

随着现代分子生物学的发展和转基因技术的日趋完善，人们试图鉴定、克隆与耐低钾有关的基因，研究其表达、调控机制，再通过转导技术将其导入目标品种，以克服种间不亲和，缩短育种年限。

但迄今为止，利用基因工程培育新品种仍存在安全性争议：外源基因的整合表达对于烟草之类的经济作物的经济性状有无影响？来源于细菌、昆虫的毒性基因有无人体的危害？既要理论上是安全的，也要克服大众的心理障碍，更主要的对外贸易、进出口的影响。由此看来，通过基因工程的途径在短期内还难以根本解决问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种筛选耐低钾烟草品种突变体的方法，以解决传统杂交育种由于性状连锁及培育时间长的问题，同时也能够解决转基因所存在的安全性不能确定，消费者存在心理障碍等问题。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种筛选耐低钾烟草品种突变体的方法，包括以下步骤：

S1、创制烟草突变一代群体：

通过EMS诱变方法创建M1代种子；

S2、耐低钾突变体的室内筛选：

通过对M1代植株的根系检测，选择符合第一设定标准的M1代植株为初筛突变株系H1，并收获H1的种子为M2代种子进行培育；

S3、M2代种子获得的植株，放入低钾浓度培养基上倒置培养，经第一特定性检测后得到复筛突变株系H2，将H2在不同生态条件的烟区种植，直接进入烟草新品种的田间选育程序；

S4、将H2植株进行第二特定性检测，筛选出符合第二设定标准的田间选育植株为突变株系；

S5、将突变株系的M3代种子进行育苗，并进行判断是否有性状分离现象，若有性状分离现象，则返回S3；若无性状分离现象，则确定M3代种子为EMS诱变后代。

所述EMS诱变方法为：

利用设定质量百分比浓度的EMS处理待处理种子第一设定时间，并使得处理后种子的致死率为50％左右。

所述EMS的质量百分比浓度为0.8％，第一设定时间为8小时。

所述第一设定标准为主根平均直径。

低钾浓度为小于等于0.1mmol/L。

所述第一特定性检测的方法包括以下步骤：

S01、选择烟草幼苗进行检测；

S02、选取对环境中钾浓度变化较为敏感的烟草幼苗根系生长性状作为筛选指标，所述筛选指标的定量指标为弯根率。