[发明专利]一种小鹅瘟精制卵黄抗体的制备方法

权利要求书

1.一种小鹅瘟口服精制卵黄抗体的制备方法，其特征在于：该口服小鹅瘟精制卵黄抗体的有效组分及其体积份数比为：含小鹅瘟卵黄抗体的卵黄酸化液70-90份、正辛酸0.05-0.15份、甲醛0.05-0.15份、蔗糖0.1-0.2份、脱脂牛奶0.01-0.02份。

2.根据权利要求1所述的一种小鹅瘟口服精制卵黄抗体的制备方法，其特征在于：其制备方法包括以下步骤：

(1)采用小鹅瘟灭活疫苗对180日龄蛋鸭进行首次免疫，用量1ml/只，首次免疫7天后进行二次免疫1ml/只，二免后14天进行再次加强免疫1ml/只，检测小鹅瘟血清抗体效价至1:512～1:1024时收集高免蛋；

(2)取步骤(1)中所收集的高免蛋洗净消毒，而后收集蛋黄，充分搅拌，使蛋黄呈均匀膏状，加入与蛋黄等体积的灭菌注射水，搅拌混匀后，60～65℃保温灭活30分钟，得卵黄匀浆备用；

(3)向无菌的酸化罐中先加入卵黄匀浆体积6倍的酸化用水，然后将步骤(2)所得卵黄匀浆缓缓中加入无菌的酸化罐中，边加边搅拌，待蛋黄液的温度降至4℃时，保温静置2～4小时，离心取上清备用；

(4)加热步骤(3)分离的上清液至15-20℃，边搅拌边加入浓度为0.1％的正辛酸，充分搅拌0.5～1.5小时，室温放置2～6小时后，以4200～5500r/min的转速离心15min，弃沉淀；用孔径5μm和1μm的筒式滤芯过滤上清液，再经截留分子量为10kD的中空纤维超滤柱进行浓缩3～4倍后再用NaOH调整PH值为6.8～7.0，并以0.45μm和0.22μm筒式滤芯过滤除菌。

(5)取步骤(4)所述滤液，加入甲醛、蔗糖和脱脂牛奶，于37℃灭活2h，定量分装，加盖密封，2～8℃保存，即得到所述一种小鹅瘟口服精制卵黄抗体。

3.根据权利要求1所述的一种小鹅瘟口服精制卵黄抗体的制备方法，其特征在于步骤(2)中所述的消毒高免蛋和收集卵黄的方法为：取步骤(1)所得高免蛋，用清水冲洗干净后浸入0.1％新洁尔灭水溶液中消毒15分钟，取出晾干，再用环氧乙烷气雾消毒30分钟后，送入蛋清蛋黄分离机分离得到卵黄，搅拌得到卵黄匀浆。

4.根据权利要求1所述的一种小鹅瘟口服精制卵黄抗体的制备方法，其特征在于步骤(3)中所得的含小鹅瘟卵黄抗体的卵黄酸化液：步骤(4)所述正辛酸体积量为(70-90份)：(0.05-0.15份)。

5.根据权利要求1所述的一种小鹅瘟口服精制卵黄抗体的制备方法，其特征在于步骤(3)中所得的含小鹅瘟卵黄抗体的卵黄酸化液：步骤(5)所述甲醛、蔗糖和脱脂牛奶体积量为(70-90份)：(0.05-0.15份)：(0.05-0.15份)：(0.1-0.2份)：(0.01-0.02份)。