[发明专利]N-甲基吡咯啉的生物合成方法有效
| 申请号： | 201811265624.0 | 申请日： | 2018-10-29 |
| 公开（公告）号： | CN111100886B | 公开（公告）日： | 2021-07-20 |
| 发明（设计）人： | 肖友利;平羽;李晓东;周志华 | 申请（专利权）人： | 中国科学院分子植物科学卓越创新中心 |
| 主分类号： | C12P17/10 | 分类号： | C12P17/10;C12N1/19;C12N1/21;C12R1/19;C12R1/865 |
| 代理公司： | 上海申浩律师事务所 31280 | 代理人： | 贾师英 |
| 地址： | 200032 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 甲基 吡咯 生物 合成 方法 | ||
1.一种制备N-甲基吡咯啉的方法，包括如下步骤：以L-鸟氨酸为底物，用氨基酸序列为SEQ ID NO:2的鸟氨酸脱羧酶EcODC、氨基酸序列为SEQ ID NO:6的腐胺-N-甲基转移酶AtPMT和三分三来源的胺氧化酶进行联合催化而得，其中
所述胺氧化酶是氨基酸序列为SEQ ID NO:14的AaDAO2或者氨基酸序列为SEQ ID NO:18的AaDAO3。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述胺氧化酶是氨基酸序列为SEQ ID NO:18的AaDAO3。
3.一种微生物，其表达如权利要求1或2所述的鸟氨酸脱羧酶EcODC、腐胺-N-甲基转移酶AtPMT和胺氧化酶。
4.如权利要求3所述的微生物，其特征在于，所述微生物选自大肠杆菌和酿酒酵母。
5.如权利要求3所述的微生物，其特征在于，所述微生物是酿酒酵母，并且敲除了基因组中代谢N-甲氨基丁醛的基因ALD4、ALD5和HFD1。
6.如权利要求5所述的微生物，其特征在于，所述酿酒酵母过表达序列为SEQ ID NO:84的辅因子合成基因SAM2。
7.如权利要求3-6中任一项中所述的微生物在制备N-甲基吡咯啉中的应用。
8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，通过如权利要求3-6中任一项中所述的微生物的发酵来生产N-甲基吡咯啉。
9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，当所述微生物是大肠杆菌时，培养基是LB培养基；当所述微生物是酿酒酵母时，培养基是YPD培养基。
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