[发明专利]一种利用玉米芯全组分生产丁酸的方法有效
申请号: | 201811144501.1 | 申请日: | 2018-09-29 |
公开(公告)号: | CN109161566B | 公开(公告)日: | 2021-07-20 |
发明(设计)人: | 江凌;郑文秀;赵倩如;黄和;朱丽英 | 申请(专利权)人: | 南京工业大学 |
主分类号: | C12P7/52 | 分类号: | C12P7/52;C12P19/14;C12P19/02;C12N11/10;C12N11/04;C12R1/145 |
代理公司: | 江苏致邦律师事务所 32230 | 代理人: | 徐蓓;尹妍 |
地址: | 211186 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 玉米芯 组分 生产 丁酸 方法 | ||
1.一种利用玉米芯全组分生产丁酸的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)玉米芯洗涤干燥后,粉碎;
(2)在氮气氛围保护下,将玉米芯粉末与1,3-二甲基咪唑磷酸二甲酯盐按照质量比1:6.5~1:19.5混合,之后添加占1,3-二甲基咪唑磷酸二甲酯盐和γ-戊内酯总质量10~16wt%的γ-戊内酯,于90~110 ℃下加热搅拌3~4h,之后冷却至室温,加入去离子水作为反溶剂,搅拌反应以沉淀玉米芯粉末,抽滤分离获得玉米芯残渣和滤液;
(3)将玉米芯残渣用去离子水洗涤并干燥后,与乙酸盐缓冲液混合,加入纤维素酶酶解,反应结束后将溶液煮沸以淬灭酶促反应,将煮沸溶液离心,获得以葡萄糖、木糖为主要成分的可发酵糖液;
(4)向步骤(2)获取的滤液中加酸调节pH,低温沉淀滤液中木质素,将木质素沉淀物用去离子水洗涤并干燥;
(5)将酪丁酸梭菌重悬于含有海藻酸钠、木质素和碳酸钙的混合溶液中,用注射器滴加进磁力搅拌的氯化钙溶液中,挤压法包埋酪丁酸梭菌;
(6)以可发酵糖液为碳源发酵包埋酪丁酸梭菌的微球,生产丁酸。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中,玉米芯粉碎粒径为80-120目。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(2)中,向经预处理的玉米芯粉末、1,3-二甲基咪唑磷酸二甲酯盐、γ-戊内酯的共混溶液中加入等体积的等离子水反溶剂。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(3)中,将玉米芯残渣按照50 g/L的底物浓度与乙酸盐缓冲液混合;乙酸盐缓冲液浓度为50 mM,pH 4.8。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(3)中,在50℃、150rpm条件下酶解。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(3)中,纤维素酶添加量为45FPU/g 干燥玉米芯残渣。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(4)中,加入盐酸缓慢酸化至pH调节至2.0,之后在4℃下冷藏沉淀木质素。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(5)中,混合溶液中含质量分数2%海藻酸钠,0.5%木质素和5%碳酸钙;氯化钙溶液浓度为11 mg/mL。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(6)中,发酵培养基的组成如下:可发酵糖液50 g/L,酵母粉5 g/L,蛋白胨5 g/L,NaCl 6 g/L,(NH4)2SO4 3 g/L,K2HPO4 1.5g/L, MgSO4·7H2O 0.6 g/L,FeSO4·7H2O 0.03 g/L,L-半胱氨酸盐酸盐0.3 g/L,0.1%刃天青,pH 6.0。
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