[发明专利]一种H-FABP高效检测试纸制备方法在审
申请号: | 201810226012.4 | 申请日: | 2018-03-19 |
公开(公告)号: | CN108414749A | 公开(公告)日: | 2018-08-17 |
发明(设计)人: | 张雷 | 申请(专利权)人: | 南京博天科智生物技术有限公司 |
主分类号: | G01N33/558 | 分类号: | G01N33/558;G01N33/68;G01N33/577 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 210000 江苏省南京市江宁区龙眠大道*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 金标垫 金标抗体 抗体 硝酸纤维素膜 捕捉抗体 高效检测 显色抗体 功能层 检测线 样品垫 玻璃纤维棉 单克隆抗体 试纸条检测 被分析物 试纸制备 速度放缓 纤维素膜 依次相连 灵敏度 固定板 纳米金 吸收垫 质控线 缓冲 金标 配对 试纸 制备 羧化 样本 释放 | ||
本发明公开了一种H‑FABP高效检测试纸的制备方法,包括设在固定板上依次相连的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸收垫;在硝酸纤维素膜上设有检测线抗体和质控线抗体;在金标垫上设有金标抗体,所述的样品垫为玻璃纤维棉制成的垫,所述的金标垫为羧化纤维素膜制成的垫,所述的金标抗体为显色抗体,检测线抗体为捕捉抗体,显色抗体与捕捉抗体为2株可互相配对形成夹心的抗人H‑FABP单克隆抗体,所述的金标抗体用40nm纳米金壳标记,所述金标垫上设有功能层。本发明通过特制的含有特定功能层的金标垫,使得金标释放速度放缓,得到缓冲,从而使样本中被分析物与金标抗体的浓度比值增大,从而提高了试纸条检测的灵敏度。
技术领域
本发明属于生物技术应用领域,具体涉及一种心型脂肪酸结合蛋白H-FABP(Heart-typeFattyAcidBindingProtein,H-FABP)高效检测试纸的制备方法。
背景技术
H-FABP存在于心肌细胞胞浆内,含量丰富。心肌受损早期,心肌细胞膜完整性被破坏,H-FABP进入血液。H-FABP在心肌受损后1-2h即可在血液中检测到。由于H-FABP心肌特异性高于目前临床常用的肌红蛋白,因此H-FABP可成为一种重要的检测急性心肌组织损伤的早期特异性标志物。目前,生化标志物的检测已广泛应用于急性心肌梗死、不稳定型心绞痛、急性心衰、心肌炎、心脏手术损伤评估、窒息新生儿心肌损伤等心肌损伤疾病的诊断、危险度分层和预后评判。美国每年因怀疑性冠状动脉综合征急诊就医病人达8000万,其中45%左右与心脏相关,15%诊断为急性冠脉综合征。我国急性冠状动脉综合征的发病率约50/10万,每年死于急性心肌梗死的人数超过100万。因此,H-FABP检测的应用具有重要的社会和经济效益。
在公告号为CN102298055B文件中,在检测样本时,试纸条表面的不干胶因刀片两边的受力不同,导致试金标垫因厚度不同而导致样本在金标垫上的流速不同,导致带有金标的抗体与样本中的被分析物结合不均匀,最终会导致检测结果的显示—检测线或控制线产生断线,即线条显示不完全的现象。此外,样品中样品添加集中添加量集中,液体流速快,样本很快的冲到金标垫上,即有大量的标记物被带到了金标垫,反而使金标垫的检测灵敏度降低。
发明内容
发明目的:针对现有技术中存在的不足,本发明的目的是提供一种心型脂肪酸结合蛋白H-FABP高效检测试纸,使其具有操作简便、灵敏度<3ng/mL、结果稳定等优点。
发明内容:本发明提供了一种心型脂肪酸结合蛋白H-FABP高效检测试纸,包括设在固定板上依次相连的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸收垫;在硝酸纤维素膜上设有检测线抗体和质控线抗体;在金标垫上设有金标抗体,所述的样品垫为玻璃纤维棉制成的垫,所述的金标垫为羧化纤维素膜制成的垫,所述的金标抗体为显色抗体,检测线抗体为捕捉抗体,显色抗体与捕捉抗体为2株可互相配对形成夹心的抗人H-FABP单克隆抗体,所述的金标抗体用40nm纳米金壳标记,所述样品垫上设有功能层;所述功能层以质量分数计由18%纯硝酸银、70%明胶、8%的司本80以及4%的环糊精组成。
上述心型脂肪酸结合蛋白H-FABP高效检测试纸的制备方法,包括以下步骤:
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- 一种免疫检测信号放大方法及使用该方法的装置-201810206863.2
- 李金峰;黎耕宇;李婷婷;刘博超 - 广州佰芮慷生物科技有限公司
- 2018-03-09 - 2019-09-17 - G01N33/558
- 本发明公开了一种免疫检测信号放大方法,其通过免疫学反应形成树枝状的纳米颗粒复合物,实现了抗原检测的高灵敏性、高特异性。
- 一种水产品中孔雀石绿快速检测方法-201910591797.X
- 赵林萍;陈小鸽;刘琳;刘慧丽;苗银萍;曹静杰;娄亚坤;徐恒岗;陶燕;李新;康雪梅;郭倩倩;毛程鑫;卜攀攀;宋贵方 - 郑州中道生物技术有限公司
- 2019-07-01 - 2019-09-10 - G01N33/558
- 一种水产品中孔雀石绿快速检测方法,鱼虾类水产品均质后,有机试剂提取,用萃取柱处理,收获洗脱液,免疫荧光卡检测。本检测方法将萃取柱快速、简便的提取方法和荧光检测卡较高的特异性、灵敏性结合,为食品安全提供有效保障。
- 一种快速时间分辨荧光免疫分析检测试剂盒及其检测方法-201910592759.6
- 谭玉华;江燚 - 广州市丰华生物工程有限公司
- 2019-07-03 - 2019-09-10 - G01N33/558
- 本发明属于时间分辨荧光免疫分析技术领域,公开了一种快速时间分辨荧光免疫分析检测试剂盒及其检测方法,快速时间分辨荧光免疫分析检测试剂盒包括:测试反应杯;校准品反应杯;空白对照培养管,其内含有抗凝血物质;测试培养管;阳性对照培养管,其内含有抗凝血物质和细胞凝集素;实验缓冲液以及浓缩洗液;本发明还公开了快速时间分辨荧光免疫分析试剂盒的检测方法。本发明的试剂盒采用了γ‑干扰素体外释放法,联合采用了生物素亲和素法,双抗体夹心时间分辨荧光免疫法,实验方法简单快速,可自动化操作,检测系统为开放式操作系统。
- 婴幼儿奶粉中多种抗生素的同步联合检测卡-201822219602.2
- 刘颖;田辉;张敏洁 - 正元盛邦(天津)生物科技有限公司
- 2018-12-27 - 2019-09-06 - G01N33/558
- 本实用新型提供了婴幼儿奶粉中多种抗生素的同步联合检测卡,包括检包括检测卡、检测面板、五条检测不同种类抗生素的胶体金试纸条,所述胶体金试纸条包括PVC底板,所述PVC底板由下至上依次搭接粘附有样品垫、单克隆抗体金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫,五条所述硝酸纤维素膜分别设有四环素类抗生素检测线、β‑内酰胺类抗生素检测线、大环内酯类抗生素检测线、氨基糖苷类抗生素检测线、氯霉素检测线,五条所述硝酸纤维素膜均设有羊抗鼠质控线;本实用新型的有益效果:方便快捷地同时检测出样品中含有的多种抗生素,特异性强,灵敏度高,无需专门的技术人员或仪器,操作简单,易于推广,适合基层大批量检测。
- 一种牛奶中微生物毒素检测装置-201822224671.2
- 田蕾雷;王萌竹 - 山东众合天成检验有限公司
- 2018-12-28 - 2019-09-06 - G01N33/558
- 本实用新型公开了一种牛奶中微生物毒素检测装置,涉及微生物毒素检测技术领域,包括支架,还包括:转辊,旋转设置于所述支架上;以及数组检测组件,每组所述检测组件沿所述转辊周向设置,用于放置检测用的检测卡。本实用新型的有益效果是,可以获得条状的检测卡,便于获取直观的测试结果,以选取实际有用的结果,尽量避免取样带来的误差。可以一次性获得多组数据,提高检测效率。可以根据实际情况,测试得到不同时间阶段的数据,并且可以在不影响测试继续进行的情况下,进行结果的读取。
- 有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留检测方法及其试纸条和制备方法-201810160607.4
- 冯锐;王丁力;龙飞;方铁铮;杨凯 - 广东志道医药科技有限公司;广州汉腾生物科技有限公司
- 2018-02-27 - 2019-09-03 - G01N33/558
- 本发明提供了一种有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留检测方法,包括以下步骤:通过动物细胞进行重组人乙酰胆碱酯酶的表达,重组人乙酰胆碱酯酶纯化后用胶体金进行标记,农药完全抗原与农药小分子竞争性地与重组人乙酰胆碱酯酶结合;将胶体金标记的重组人乙酰胆碱酯酶、农药完全抗原、重组人乙酰胆碱酯酶抗体等组装成试纸条;需要检测的样品经前处理后,用提取溶剂提取,得到样品溶液,将适量样品溶液滴加到样品垫上,样品溶液将会向吸水垫端移动,待3~15分钟后,根据检测线和控制线的显色情况,判断样品中是否含有有机磷类或氨基甲酸酯类农药残留。本发明可对大部分有机磷类和氨基甲酸酯类农药进行特异性识别,检测范围宽,灵敏度高。
- 用于检测混合物中特定分析物的固定相、其用途和用于检测混合物中特定分析物的方法-201780082214.X
- 拉尔夫·斯珀林;拉尔夫·希默尔赖希;托拜厄斯·顺克;拉斐尔·蒂尔曼 - 弗劳恩霍夫应用研究促进协会
- 2017-11-07 - 2019-09-03 - G01N33/558
- 提供了一种用于检测混合物中至少一种特定分析物的固定相。所述固定相包括固相,所述固相划分为用于通过毛细力输送液体的多个区。所述固相包括:至少一个第一区,其适于接收液体样品;第二区,其上固定有受体,所述受体适于结合配体;和第三区,其上固定有量子点,所述量子点作为FRET供体并通过至少一个寡核苷酸接头连接至至少一个合适的FRET受体。所述固定相具有改进的检测灵敏度,并允许大多数不同的分析物的同时及多参数检测。提出了所述固定相的用途,并且还提供了一种用于检测混合物中至少一种特定分析物的方法。
- 一种尿液外泌体ELISA的检测方法及其应用-201910541257.0
- 江海松;张杰文;富磊;孙瑞华 - 上海惠皓医疗科技有限公司
- 2019-06-21 - 2019-08-30 - G01N33/558
- 本发明公开了一种外泌体检测的ELISA方法,还提供一种检测尿液外泌体的ELISA检测方法在阿尔茨海默病的评估和防治方面的应用。本方法具有可靠、快速、经济地无创检测外泌体的特点,本发明的检测方法也不需要昂贵且精密的实验仪器,具有很大的应用前景。
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