[发明专利]与甜瓜黄绿叶色基因ygl紧密连锁的分子标记有效

专利信息
申请号: 201711457816.7 申请日: 2017-12-28
公开(公告)号: CN107868847B 公开(公告)日: 2020-12-04
发明(设计)人: 杨路明;朱华玉;宋芃垚;胡建斌;孙守如 申请(专利权)人: 河南农业大学
主分类号: C12Q1/6895 分类号: C12Q1/6895;C12N15/11
代理公司: 郑州联科专利事务所(普通合伙) 41104 代理人: 时立新
地址: 450002 河*** 国省代码: 河南;41
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摘要:
搜索关键词: 甜瓜 绿叶 基因 ygl 紧密 连锁 分子 标记
【权利要求书】:

1.与甜瓜黄绿叶色基因ygl紧密连锁的分子标记,包括分子标记Indel24和分子标记Indel43,其特征在于;

所述分子标记Indel24,由一对PCR扩增用的上游引物Indel24-F和下游引物Indel24-R组成,具体而言:

Indel24-F: 5’-CCTATTCTCCCCCACTTTGC-3’,

Indel24-R: 5’-CCCAACCTCTCAAACAGCTC-3’;

利用分子标记Indel24定位黄绿叶色基因ygl时,可PCR扩增获得191 bp的紧密连锁的特征条带,所述191bp紧密连锁的特征条带的具体碱基序列如SEQ ID NO.1所示;

利用分子标记Indel24定位正常叶色基因YGL时,可PCR扩增获得206 bp的紧密连锁的特征条带,所述206 bp紧密连锁的特征条带的具体碱基序列如SEQ ID NO.2所示;

所述分子标记Indel43,由一对PCR扩增用的上游引物Indel43-F和下游引物Indel43-R组成,具体而言:

Indel43-F: 5’-GCCCTACCAATTGTAAATCA-3’,

Indel43-R: 5’- GAAATTAGGCGTATTGAAATTCT-3’;

利用分子标记Indel43定位黄绿叶色基因ygl时,可PCR扩增获得200 bp的紧密连锁的特征条带,所述200bp紧密连锁的特征条带的具体碱基序列如SEQ ID NO.3所示;

利用分子标记Indel 43定位正常叶色基因YGL时,可PCR扩增获得196bp的紧密连锁的特征条带,所述196 bp紧密连锁的特征条带的具体碱基序列如SEQ ID NO.4所示。

2.如权利要求1所述与甜瓜黄绿叶色基因ygl紧密连锁的分子标记,其特征在于,PCR扩增时,10μL扩增体系设计如下:

基因组模板DNA,30ng/μL、1μL;

上游引物、下游引物,各0.5μL、引物浓度均为5 μmol/L;

PCR MagicMix,5.0μL;

ddH2O,3.0μL;

PCR扩增程序为:94℃、5min;94℃、30s,55℃、30s,72℃、30s,35个循环;72℃5min。

3.权利要求1所述与甜瓜黄绿叶色基因ygl紧密连锁的分子标记在分子育种的应用,其特征在于,用于识别、定位甜瓜黄绿叶色基因ygl和/或正常叶色基因YGL。

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