[发明专利]鉴别岱衢族大黄鱼和闽-粤东族大黄鱼的方法及其用途在审
| 申请号： | 201711348834.1 | 申请日： | 2017-12-15 |
| 公开（公告）号： | CN108048576A | 公开（公告）日： | 2018-05-18 |
| 发明（设计）人： | 曾霖 | 申请（专利权）人： | 浙江海洋大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12N15/11 |
| 代理公司： | 杭州浙科专利事务所(普通合伙) 33213 | 代理人： | 吴秉中 |
| 地址： | 316000 浙江省舟*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 鉴别 岱衢族 大黄鱼 粤东 方法 及其 用途 | ||
1.鉴别岱衢族大黄鱼和闽-粤东族大黄鱼的方法，其特征在于鉴定引物为：
J1：F1:5’- GGCATTTACACACATGGAC-3’;R1: 5’-GGGATCACAACAGAGCGG -3’
J2：F2:5’- CATTCCCTTCCGCGCTAGT-3’;R2: 5’- GGCTGCAAGTTCCTGAC -3’。
2.根据权利要求1所述的鉴别岱衢族大黄鱼和闽-粤东族大黄鱼的方法，其特征在于以下步骤：
1）提取大黄鱼总DNA作为模板DNA，琼脂电泳检测DNA质量，紫外分光光度计测定DNA浓度，并设计鉴定引物：
J1：F1:5’- GGCATTTACACACATGGAC-3’;R1: 5’-GGGATCACAACAGAGCGG -3’
J2：F2:5’- CATTCCCTTCCGCGCTAGT-3’;R2: 5’- GGCTGCAAGTTCCTGAC -3’；
2）配置PCR扩增体系，并进行PCR扩增，取扩增得到的产物进行琼脂糖凝胶电泳检测，并采用紫外凝胶成像系统观察、照相，根据得到的琼脂电泳图鉴定岱衢族大黄鱼和闽-粤东族大黄鱼。
3. 根据权利要求1所述的鉴别岱衢族大黄鱼和闽-粤东族大黄鱼的方法，其特征在于：所述的PCR扩增体系为25μL，各成分及终浓度为 Buffer10mM，dNTP 0.2mM，MgCl
4. 根据权利要求1所述的鉴别岱衢族大黄鱼和闽-粤东族大黄鱼的方法，其特征在于：所述的PCR 反应程序为95℃预变性5min，然后95℃变性20s，60℃退火20s，72℃延伸1min，进行30个循环，最后72℃延伸5min。
5.根据权利要求1所述的鉴别岱衢族大黄鱼和闽-粤东族大黄鱼的方法，其特征在于：所述的大黄鱼DNA的提取采用标准酚-氯仿法。
6.根据权利要求1所述的鉴别岱衢族大黄鱼和闽-粤东族大黄鱼的方法，其特征在于：所述的琼脂糖凝胶的浓度为1％-1.5％。
7.根据权利要求1所述的鉴别岱衢族大黄鱼和闽-粤东族大黄鱼的方法，其特征在于：所述的根据琼脂电泳图鉴定岱衢族大黄鱼和闽-粤东族大黄鱼的方法为将电泳结果与标准图谱对比，若图谱中1000~1500bp区间内仅有一条1250bp的条带，则为岱衢族大黄鱼；若图谱中1000~1500bp区间内仅有一条1085bp的条带，则为闽-粤东族大黄鱼。
8.鉴别岱衢族大黄鱼和闽-粤东族大黄鱼的用途，其特征在于用于快速、准确地鉴别岱衢族大黄鱼和闽-粤东族大黄鱼的用途。
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