[发明专利]一种磁微粒化学发光定量检测UCHL-1的试剂盒及其制备方法

说明书

本发明涉及医学体外诊断领域，具体涉及一种磁微粒化学发光定量检测UCHL‑1的试剂盒及其制备方法，本发明提供的一种磁微粒化学发光定量检测UCHL‑1的试剂盒，包括磁分离试剂、抗体试剂、酶标试剂、底物、洗液、校准品、质控品、磁套和吸头。本发明还公开了上述试剂盒的制备方法。本发明所述试剂盒能够提高检测上限、反应速度和检测结果的灵敏度。

技术领域

本发明涉及医学体外诊断领域，具体涉及一种磁微粒化学发光定量检测UCHL-1的试剂盒及其制备方法。

背景技术

泛素羧基末端水解酶-1(ubinquitin COOH-terminal hydrolase-L1,UCHL-1)是泛素化酶的一种。泛素-蛋白酶体途径是调控细胞内蛋白活性的一种重要途径。其调控的对象主要是细胞内结构受损或需要及时清除的功能蛋白。UCHL-1是由233个氨基酸组成的一类半胱氨酸水解酶，分子质量约24.8kD。UCHL-1最早在脑组织中发现，其含量丰富，约占全部脑蛋白的2％。创伤性脑损伤(TBI)脑损伤后不仅造成脑细胞的机械性损伤，还使血脑屏障受到破坏，通透性增高，同时产生一系列继发性病理生理改变，从而使坏死崩解的蛋白易于通过血脑屏障，导致脑脊液或血液中蛋白增高。UCHL-1作为脑损伤生物学标记物，在血清中的含量能够反映损伤程度并提示预后，TBI患者血清中的UCHL-1异常升高，可反映急性期脑组织损伤严重程度，其水平与陆脑损伤患者预后呈负相关，对指导TBI的临床诊疗有重大意义。阿尔兹海默病(AD)在阿尔兹海默病患者脑组织中存在泛素和UCHL-1的神经纤维结，而可溶性的UCHL-1含量减少。功能性UCHL-1水平下降被认为在AD的发生发展过程中起一定作用。

目前检测UCHL-1的技术有半定量的免疫印迹、免疫组织化学方法；定量的酶联免疫吸附(ELISA)、质谱法、基于荧光的多重技术等。其中定量检测技术由于其量化结果的特点，在临床指导意义上优于半定量检测技术。在定量检测技术中，ELISA方法相对于其他方法具有检测时间短、检测成本低的优点，市场上的UCHL-1检测试剂盒绝大部分均采用ELISA的检测方法。本试剂盒采用磁微粒化学法检测与现有技术相比，在检测时间，灵敏度上具有大大提高。

发明内容

为了克服现有技术中的缺陷，本发明提供一种磁微粒化学发光定量检测UCHL-1的试剂盒，能够实现UCHL-1准确和高精确地定量测定。

本发明是通过如下技术方案来实现的：

所述试剂盒包括：磁分离试剂、抗体试剂、酶标试剂、底物、洗液、校准品、质控品、磁套和吸头；

所述磁分离试剂为1个含有链霉亲和素标记的磁微粒和牛血清白蛋白的Tris缓冲液瓶；

所述抗体试剂为1个含有生物素标记的抗体和牛血清白蛋白的Tris缓冲液瓶；

所述酶标试剂为1个含有碱性磷酸酶标记的抗体和牛血清白蛋白的Tris缓冲液瓶；

所述底物为1个含有光泽精的Tris缓冲液瓶；

所述洗液为1个含有吐温-20、NaCl的Tris缓冲液瓶；

所述校准品包括2个液体校准瓶，所述液体校准瓶内目标浓度分别为0.5ng/ml、4ng/ml的UCHL-1抗原和牛血清白蛋白的Tris缓冲液；

所述质控品包括1个质控瓶，所述质控瓶内为1ng/ml的UCHL-1抗原和牛血清白蛋白的Tris缓冲液；

所述磁套为1个保护磁棒避免污染的塑料管；

所述吸头为1个转移200ul液体的塑料管。

进一步的，所述磁微粒为羧基磁球。

进一步的，所述磁微粒直径为1-10μm。

进一步的，所述磁微粒直径为4μm。