[发明专利]一种水解牛乳过敏源β-乳球蛋白蛋白酶的分离纯化及应用有效
| 申请号： | 201711191890.9 | 申请日： | 2017-11-24 |
| 公开（公告）号： | CN109837219B | 公开（公告）日： | 2020-09-04 |
| 发明（设计）人： | 张娟;郑天飞;堵国成;陈坚;汤恒;杨佩珊;马浩 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N9/54;C12R1/125 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214122 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 水解 牛乳 过敏 球蛋白 蛋白酶 分离 纯化 应用 | ||
1.一株产蛋白酶的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)S7，其特征在于，于2016年9月27日保藏于中国典型培养物保藏中心，菌种保藏编号CCTCC NO:M2016532，保藏地址为武汉大学保藏中心。
2.应用权利要求1所述的枯草芽孢杆菌S7发酵生产水解牛乳过敏源β-乳球蛋白的粗酶液的方法，其特征在于，具体步骤如下：
(1)将枯草芽孢杆菌S7接种至培养基中培养得到种子液；
(2)将种子液接种于培养基中发酵培养得到发酵液；
(3)将发酵液离心，收集发酵液上清即为粗酶液。
3.根据权利要求2所述的发酵方法，其特征在于，具体步骤如下：
(1)将枯草芽孢杆菌S7接种至AM液体培养基或PDA液体培养基中培养得到种子液；
(2)将种子液按体积2-5％接种量接种于PDA液体培养基中发酵培养得到发酵液；
(3)将发酵液离心，收集发酵液上清即为粗酶液。
4.根据权利要求3所述的发酵方法，其特征在于，所述AM液体培养基成分为：葡萄糖10g/L，酵母粉5g/L，蛋白胨10g/L，MgSO4 0.5g/L，KH2PO4 2g/L，CaCl2 0.2g/L；所述PDA液体培养基成分为：葡萄糖20g/L，马铃薯200g/L。
5.根据权利要求3所述的发酵方法，其特征在于，所述步骤(1)中的培养为，在35-39℃，180-260rpm培养10-16h得到种子液。
6.根据权利要求3所述的发酵方法，其特征在于，所述步骤(2)中的发酵培养为，在35-39℃，180-260rpm发酵10-16h得到发酵液。
7.权利要求2所述的粗酶液在消除牛奶过敏源中的应用。
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