[发明专利]一种来自解淀粉芽孢杆菌SQR9产生的十四碳链脂肪酸类拮抗物质及其应用

权利要求书

1.一种从解淀粉芽孢杆菌SQR9中分离十四碳链脂肪酸类拮抗物质的方法,其特征在于包括：发酵保藏编号为CGMCC NO.5808的解淀粉芽孢杆菌SQR9，发酵结束后，将发酵液离心，收集上清液，上清液干燥去除水分后，用甲醇浸提，浓缩浸提液得浸膏；浸膏上硅胶柱，以氯仿-甲醇梯度洗脱，收集氯仿-甲醇体积比20:1的洗脱液；将氯仿-甲醇20:1洗脱液去除溶剂后用甲醇溶解，进一步运用MPLC ODS色谱柱用甲醇-水梯度洗脱，收集体积分数80%甲醇-水洗脱液进一步运用反相HPLC法进行深入的分离纯化，在乙腈-水65:35，流速2 mL/min，检测波长为210 nm, Rt=10.4下得到十四碳链脂肪酸类拮抗物质；所述的十四碳链脂肪酸类拮抗物质,结构如下所示:

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2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于发酵保藏编号为CGMCC NO.5808的解淀粉芽孢杆菌SQR9的发酵培养基为Landy培养基。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于解淀粉芽孢杆菌SQR9的发酵方法包括：按1%的接种量将SQR9种子液转接到新鲜的Landy培养基锥形瓶中，37℃，170rpm，12h；再将培养后的菌液接种到7L的小型发酵罐中，发酵罐中填充5L的Landy培养基，37℃，200rpm培养12h；将7L发酵罐中的菌液接种到150L发酵罐中，发酵罐中填充100L的Landy培养基，开始时转速为30℃，转速200rpm，溶氧值75，消泡剂为聚醚类化合物，当溶氧值开始降到30以下时，逐渐提高转速，最高为500rpm，同时增加通气量，将溶氧值保持在10以上，直至OD₆₀₀=15，此时将转速调至200rpm，通气量降低至最小，菌液进入稳定期，开始大量产生次级代谢产物，发酵24h。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的浸膏加甲醇使充分溶解，溶解液加等质量100～200目硅胶使充分混合，减压浓缩干燥即得拌样硅胶；另称取2倍浸膏质量的100～200目硅胶置于玻璃色谱柱当中作为分离硅胶，以氯仿-甲醇体积比为1:0; 100:1; 80:1; 60:1; 40:1; 20:1梯度洗脱。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于对反相HPLC法分离到的活性组分通过凝胶色谱进行分离去除无活性的杂质，最后得到所述的十四碳链脂肪酸类拮抗物质的纯品。

6.权利要求1所述的十四碳链脂肪酸类拮抗物质在制备抑制植物病原真菌及病原细菌生长的制剂中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于所述的病原细菌为革兰氏阳性细菌。

8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于所述的十四碳链脂肪酸类拮抗物质在抑制黄瓜尖孢镰刀菌、菌核菌、香蕉尖孢镰刀菌、辣椒疫霉、马铃薯立枯丝核菌、禾谷丝核菌及茄科劳尔菌、金黄色葡萄球菌生长中的应用。