[发明专利]抗肿瘤的多肽及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种抗肿瘤的多肽及其制备方法和应用，该抗肿瘤的多肽包括依次连接的TERT抗原表位肽P572、第一连接片段和TERT抗原表位肽P540，TERT抗原表位肽P572的N‑末端和TERT抗原表位肽P540的N‑末端分别设有起始密码子，第一连接片段包括至少三个连接氨基酸，连接氨基酸选自甘氨酸、丝氨酸和丙氨酸中的一种。TERT抗原表位肽P572和TERT抗原表位肽P540依次连接形成的多肽相比对照组，能够更加有效的抑制肿瘤的生长，体内抗肿瘤效果好。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种抗肿瘤的多肽及其制备方法和应用。

背景技术

肿瘤极大地危害人类的健康，是全球性的公共卫生问题之一。肿瘤的免疫治疗可以刺激机体免疫系统对肿瘤的攻击，端粒酶逆转录酶(telomerase reversetranscriptase，TERT)是端粒酶的催化肽亚基，它在超过85％的人类肿瘤细胞内高表达，但在正常体细胞中却表达极低或完全不表达，这使得它成为了肿瘤免疫治疗的理想靶标。用TERT特异性细胞毒T淋细胞(cytotoxic T lymphocyte，CTL)免疫小鼠可以触发抗肿瘤细胞毒性T淋巴细胞反应，并且能够杀死TERT阳性的多种组织内的肿瘤细胞。通过计算机程序筛选TERT氨基酸序列中能够结合人类白细胞抗原Ⅰ类或Ⅱ类蛋白质，并引发TERT特异性免疫应答的表位，发现了许多TERT肽，包括抗原表位肽P540、抗原表位肽P572、抗原表位肽P672和抗原表位肽P973等等，单个的抗原表位肽在体外能够使得TERT特异性CTL或辅助T细胞应答，但这些TERT肽在体内抗肿瘤效果不够理想。

发明内容

基于此，有必要提供一种体内抗肿瘤效果较好的抗肿瘤的多肽及其制备方法和应用。

一种抗肿瘤的多肽，包括依次连接的TERT抗原表位肽P572、第一连接片段和TERT抗原表位肽P540，所述TERT抗原表位肽P572的N-末端和所述TERT抗原表位肽P540的N-末端分别设有起始密码子，所述第一连接片段包括至少三个连接氨基酸，所述连接氨基酸选自甘氨酸、丝氨酸和丙氨酸中的一种。

在一个实施方式中，所述多肽为：

(a)、由SEQ ID No.1所示的氨基酸序列组成的多肽；

(b)、与SEQ ID No.1所示的氨基酸序列组成的多肽具有至少98％同源性的多肽，或

(c)、由SEQ ID No.1所示的氨基酸序列组成的多肽，其中一个或多个氨基酸被缺失、替代或增加得到的多肽。

在一个实施方式中，所述多肽为：

(a)、由SEQ ID No.2所示的核苷酸序列组成的多核苷酸编码得到的多肽；

(b)、与SEQ ID No.2所示的核苷酸序列组成的多核苷酸具有至少98％同源性的多核苷酸编码得到的多肽；或

(c)、由SEQ ID No.2所示的核苷酸序列组成的多核苷酸，其中一个或多个碱基被缺失、替代或增加得到的多核苷酸编码得到的多肽。

在一个实施方式中，所述多肽还包括TERT抗原表位肽P672和第二连接片段，所述TERT抗原表位肽P572、所述第一连接片段、所述TERT抗原表位肽P672、所述第二连接片段以及所述TERT抗原表位肽P540依次连接，所述TERT抗原表位肽P672的N-末端设有起始密码子，所述第二连接片段包括至少三个所述连接氨基酸。

在一个实施方式中，所述多肽为：

(a)、由SEQ ID No.3所示的氨基酸序列组成的多肽；

(b)、与SEQ ID No.3所示的氨基酸序列组成的多肽具有至少98％同源性的多肽，或