[发明专利]一种通过生物技术扩增脱氧胸苷三磷酸的方法在审
| 申请号： | 201710358519.0 | 申请日： | 2017-05-19 |
| 公开（公告）号： | CN107164363A | 公开（公告）日： | 2017-09-15 |
| 发明（设计）人： | 陈华成 | 申请（专利权）人： | 太仓新亚逊生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/10 | 分类号： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京华仲龙腾专利代理事务所(普通合伙)11548 | 代理人： | 李静 |
| 地址： | 215400 江苏省苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 通过 生物技术 扩增 脱氧胸苷三磷酸 方法 | ||
1.一种通过生物技术扩增脱氧胸苷三磷酸的方法，其特征在于：其包括：脱氧胸苷三磷酸模版DNA、限制性切刻酶、DNA聚合酶、脱氧核苷三磷酸、与靶核酸序列3’末端互补的寡核苷酸引物、表面活性剂，所述方法包括以下步骤：
a、在样品脱氧胸苷三磷酸模版DNA培养液中加入一种或多种能够在所选限制位点切割DNA的限制性切刻酶，该限制性切刻酶在该DNA的一条链上形成特定的3’末端；
b、加入寡核苷酸引物，该启动子引物5’区域包含被DNA的RNA聚合酶所识别的启动子序列，且其3’区域与步骤a形成的DNA特定的3’末端互补；
c、向样品中加入DNA聚合酶，脱氧核苷三磷酸，表面活性剂；
d、控制温度，将如此形成的混合物保持足够的时间，以进行扩增。
2.根据权利要求1所述一种通过生物技术扩增脱氧胸苷三磷酸的方法，其特征在于：至少两种与靶核酸序列3’末端互补的寡核苷酸引物。
3.根据权利要求1所述一种通过生物技术扩增脱氧胸苷三磷酸的方法，其特征在于：至少一种具有链置换能力的DNA聚合酶。
4.根据权利要求1所述一种通过生物技术扩增脱氧胸苷三磷酸的方法，其特征在于：至少一种脱氧核苷三磷酸。
5.根据权利要求1所述一种通过生物技术扩增脱氧胸苷三磷酸的方法，其特征在于：所述表面活性剂为聚氧乙烯失水山梨醇单脂肪酸脂。
6.根据权利要求1所述一种通过生物技术扩增脱氧胸苷三磷酸的方法，其特征在于：所述培养液的温度控制在40℃～50℃内。
7.根据权利要求1～6任意一项所述一种通过生物技术扩增脱氧胸苷三磷酸的方法，其特征在于：所述溶液在基本恒温的条件下进行扩增的时间为45～60分钟。
8.根据权利要求1～6任意一项所述一种通过生物技术扩增脱氧胸苷三磷酸的方法，其特征在于：所述溶液的PH值控件在7.0－8.0。
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