[发明专利]原核生物中的糖基化蛋白表达有效
申请号: | 201710342567.0 | 申请日: | 2009-01-05 |
公开(公告)号: | CN107119095B | 公开(公告)日: | 2022-07-05 |
发明(设计)人: | M.德利萨;C.瓜里诺;T.曼塞尔;A.费希尔 | 申请(专利权)人: | 康乃尔研究基金会有限公司 |
主分类号: | C12P21/00 | 分类号: | C12P21/00;C07K16/12 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 杜艳玲;鲁炜 |
地址: | 美国*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 生物 中的 糖基化 蛋白 表达 | ||
1.一种产生糖基化蛋白的方法,所述方法包括:
提供包含Alg13和Alg14以及Alg1和Alg2的原核宿主细胞,所述Alg13和Alg14的特征在于真核多萜醇基连接的UDP-GlcNAc转移酶活性,且所述Alg1和Alg2的特征在于真核甘露糖基转移酶活性,其中编码Alg13的核苷酸序列如SEQ ID NO: 2所示,编码Alg14的核苷酸序列如SEQ ID NO: 4所示,编码Alg1的核苷酸序列如SEQ ID NO: 6所示,编码Alg2的核苷酸序列如SEQ ID NO: 8所示;其中所述宿主细胞是大肠杆菌(
在有效产生糖基化蛋白的条件下培养所述原核宿主细胞。
2.权利要求1所述的方法,其中所述原核宿主细胞还包含真核翻转酶活性。
3.权利要求2所述的方法,其中所述真核翻转酶活性包括Rft1活性。
4.权利要求1所述的方法,其中所述原核宿主细胞还包含真核寡糖基转移酶活性。
5.权利要求4所述的方法,其中所述寡糖基转移酶活性包括STT3活性。
6.权利要求1所述的方法,其中所述糖基化蛋白为糖基化抗体,所述糖基化抗体包含:
识别并结合天然抗原的Fv部分和
在保守的天冬酰胺残基处被糖基化的Fc部分。
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