[发明专利]一种重组蛋白及其制备方法和应用有效
| 申请号： | 201611161610.5 | 申请日： | 2016-12-15 |
| 公开（公告）号： | CN108218970B | 公开（公告）日： | 2021-08-13 |
| 发明（设计）人： | 游欣欣;石琼;张新辉;阮志强;陈洁明;徐军民 | 申请（专利权）人： | 深圳华大生命科学研究院;深圳华大海洋科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/435 | 分类号： | C07K14/435;C12N15/12;C12N15/70;B01J20/24;B01J20/30;C02F1/28;G21F9/18;C02F101/20 |
| 代理公司： | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人： | 巩克栋;侯桂丽 |
| 地址： | 518083 广东省深圳市*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 重组 蛋白 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种重组蛋白，其特征在于，所述重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种DNA片段，其特征在于，其包含编码权利要求1所述重组蛋白的核苷酸序列。
3.根据权利要求2所述的DNA片段，其特征在于，所述DNA片段的核苷酸序列如SEQ IDNO.2所示。
4.一种表达载体，其特征在于，所述表达载体含有至少一个拷贝的如权利要求2或3所述的DNA片段。
5.一种宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞含有权利要求4所述的表达载体。
6.一种如权利要求1所述的重组蛋白的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)根据翡翠贻贝足丝蛋白设计引物，以全合成的翡翠贻贝足丝蛋白基因为模板进行扩增；
(2)将步骤(1)扩增得到的基因片段克隆到载体中，构建重组质粒；
(3)将重组质粒转化大肠杆菌，得到重组大肠杆菌，然后对重组大肠杆菌诱导表达，超声破碎收获重组蛋白，透析复性后得到具有活性的翡翠贻贝足丝重组蛋白。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述引物为SEQ ID NO.3-4所示的序列。
8.根据权利要求6或7所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述基因片段克隆到载体中连接到BamH I和XhoI克隆位点。
9.一种如权利要求1所述的重组蛋白、如权利要求2或3所述的DNA片段、如权利要求4所述的表达载体、如权利要求5所述的宿主细胞在富集重金属离子中的应用；
所述重金属离子为镉。
10.一种如权利要求1所述的重组蛋白、如权利要求2或3所述的DNA片段、如权利要求4所述的表达载体、如权利要求5所述的宿主细胞在治理重金属污染水体中的应用；
所述重金属为镉。
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