[发明专利]一种用于口服蛋白免疫载体的制备方法

权利要求书

1.一种用于口服蛋白疫苗载体的制备方法，其特征在于，该方法包括以下几个步骤：

(1)将模板剂十六烷基三甲基溴化铵溶于去离子水中，依次加入氨水，乙醇，乙醚在室温下剧烈搅拌至溶液澄清，快速滴加正硅酸四乙酯(TEOS)，剧烈搅拌反应，得到白色固体沉淀；

(2)将步骤(1)中所得的沉淀进行抽滤，用乙醇和水洗涤，然后将沉淀物置于烘箱中干燥；

(3)将步骤(2)干燥后的固体粉末置于硝酸铵/乙醇溶液中加热搅拌回流，除去介孔二氧化硅中的模板剂(CTAB)；

(4)将模型药物牛血清蛋白(BSA)溶于磷酸盐缓冲液中，溶胀过夜；

(5)将BSA溶液与处理过的介孔二氧化硅按一定的质量比例，置于磷酸盐缓冲液中，在4度搅拌24小时，离心，冻干沉淀物；

(6)将壳聚糖(CS)溶于1％醋酸溶液中，磁力搅拌至其完全溶解，用氢氧化钠溶液调节壳聚糖溶液PH至5.5左右；

(7)将载有BSA的介孔二氧化硅冻干粉加入到壳聚糖溶液中，在4度下搅拌10小时，离心，冻干沉淀物。

2.根据权利要求1中一种用于口服蛋白疫苗载体的制备方法，其特征在于：步骤(1)中模板剂十六烷基三甲基溴化铵的质量为0.2～0.5g，步骤(1)所述正硅酸四乙酯，水，氨水，乙醇，乙醚溶液的体积为2.5∶70∶0.8∶5～25∶20，氨水溶液的质量分数为25～28％，步骤(1)中剧烈搅拌的时间为0.5h，剧烈搅拌反应的时间为4h。

3.根据权利要求1中一种用于口服蛋白疫苗载体的制备方法，其特征在于：步骤(2)烘箱温度为60度，干燥时间为24h。

4.根据权利要求1中一种用于口服蛋白疫苗载体的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，步骤(2)固体粉末质量为0.5g，硝酸铵/乙醇的浓度为6g/L，体积为100mL，乙醇的质量分数为95％，回流温度为60度，回流时间为5h。

5.根据权利要求1中一种用于口服蛋白疫苗载体的制备方法，其特征在于：步骤(4)所选择的药物仅为模型药物BSA，但不局限于此，药物还可以是用于预防小儿麻痹症、流感等疾病的蛋白疫苗，BSA的浓度在0.2～6mg/ml，优先选择2mg/ml。

6.根据权利要求1中一种用于口服蛋白疫苗载体的制备方法，其特征在于：步骤(5)中蛋白药物BSA与介孔二氧化硅的质量比在5∶1～1∶20，优先选择1∶1。

7.根据权利要求1中一种用于口服蛋白疫苗载体的制备方法，其特征在于：步骤(6)中壳聚糖的浓度为2～6mg/ml，优先选择2mg/ml。

8.根据权利要求1中一种用于口服蛋白疫苗载体的制备方法，其特征在于：步骤(7)中载有BSA的介孔二氧化硅冻干粉的质量为10mg，壳聚糖溶液的体积为1mL。

9.根据权利要求1中一种用于口服蛋白疫苗载体的制备方法，其特征在于：步骤(4)、(5)中的磷酸盐缓冲液的PH值为7.4。