[发明专利]改造抗体-应激蛋白融合物

说明书

本发明涉及改造抗体‑应激蛋白融合物。提供了包含改造抗体和应激蛋白的融合多肽，其以高亲和力与抗原结合，是高免疫原性的，显示MHC I类致敏，并且能够在非哺乳动物细胞例如大肠杆菌中生产。

本申请是申请日为2007年2月2日的中国专利申请200780010776.X“改造抗体-应激蛋白融合物”的分案申请。

政府支持

本发明部分在由Accelerated Drug and Vaccine Development with FormerSoviet Union Institutions in Support of the U.S.Department of StateBioIndustry Initiative授予的Department of State Grant S-LMAQM-04-GR-164的政府支持下进行。因此，美国政府在本发明中拥有某些权利。

技术领域

本发明涉及融合蛋白。具体涉及改造抗体-应激蛋白融合多肽。

背景技术

经典单克隆抗体通常在哺乳动物细胞中生产，这种生产方法的缺点包括生产和选择合适的克隆的困难，和培养哺乳动物细胞的费用。“下一代”单克隆抗体在大肠杆菌(E.coli)中进行改造。近来，由多肽接头栓系在一起的V_H和V_L结构域的微生物表达已造成了产生改造的“小型抗体(mini-antibodies)”的能力。这些小型抗体可以在大肠杆菌中以实际上组合的方式来产生。这些人工生成的Fab或单链F_V(scFv)可以连接在一起以形成多聚体，例如双抗体、三链抗体和四抗体(tetrabodies)。尽管它们能够以几乎抗体样的效率与抗原结合，但这些改造的、Fc缺陷的小型抗体缺乏与抗原呈递细胞相互作用的能力并且是弱免疫原性的。

改造抗体的免疫原性缺乏的现有解决方案涉及指导抗原结合部位之一与免疫细胞直接结合。这使它们对合(in apposition)，但不导致相同的MHC I类致敏(priming)，如对于单克隆抗体观察到的。

发明内容

在一个方面，提供了改造抗体例如Fab或scFv与应激蛋白例如HSP70的融合物。应激蛋白在将抗原呈递给抗原呈递细胞且引起T细胞应答方面非常有效。它们在通过这种途径引发细胞介导的免疫和体液免疫应答方面特别有效。

因此，融合分子以高亲和力与抗原结合，是高免疫原性的，显示MHC I类致敏，引起T细胞应答并且能够在非哺乳动物系统例如大肠杆菌中生产。融合分子因此适合于用作高免疫原性疫苗用于预防或治疗传染性、炎性、自身免疫性或恶性病。

因此，提供了包含至少一种改造抗体和至少一种应激蛋白的融合多肽。这些包含改造抗体的融合多肽可以是多价的，即它们可以是二价、三价、四价、五价的等。此外，它们可以是单特异性或多特异性的。

还提供了编码改造抗体-应激蛋白融合多肽的核酸和载体、包含核酸和载体的宿主细胞以及用于生产改造抗体-应激蛋白融合多肽的方法。抗原组合位点或改造抗体片段可以快速且以高亲和力产生，并且可以廉价地与应激蛋白融合。

进一步提供了包含主题改造抗体-应激蛋白融合多肽的药物和疫苗组合物。此种组合物可以进一步包含佐剂或其他试剂。还提供了预防或治疗患者中的传染性、炎性、自身免疫性或恶性病的方法，其包括给有此需要的患者施用有效量的任何一种前述组合物。

用于实践该方法的试剂盒也在本文中得到描述。

其他特征和优点由于下述详细描述和权利要求将是显而易见的。

附图说明

图1描述了示例性改造抗体-应激蛋白融合多肽，其包含四价Tandab(改造抗体)和HSP70(应激蛋白)。