[发明专利]蝇蛆耐热蛋白提取物及其制备方法和应用有效
申请号: | 201610080954.7 | 申请日: | 2016-02-04 |
公开(公告)号: | CN105622714A | 公开(公告)日: | 2016-06-01 |
发明(设计)人: | 杨文哲;牛艺;郑冬;丛佩青;牛惠然;林丽;杨得坡 | 申请(专利权)人: | 中山市尤利卡天然药物有限公司 |
主分类号: | C07K1/14 | 分类号: | C07K1/14;C07K1/34;A61K38/17;A61K9/48;A61K9/16;A61P1/12 |
代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 郑彤 |
地址: | 528437 广东省中山市*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 耐热 蛋白 提取物 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种蝇蛆耐热蛋白提取物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)漂洗消毒:将新鲜蝇蛆反复漂洗,排除虫体内容物,再将漂洗干净后 的蝇蛆消毒;
(2)粗蛋白的提取:将漂洗消毒后的蝇蛆加入提取液充分匀浆,再离心, 弃去上层油脂和不溶性沉淀,得中间清液,备用;所述提取液为pH6~10的磷 酸二氢钠-磷酸氢二钠的缓冲溶液,其中含有体积分数为1%~50%的甘油,质量 分数为0.1%~10%的氯化钠,0.1~10mmol/L乙二胺四乙酸二钾,体积分数为 0.1%~10%β-巯基乙醇;
(3)去除不耐热组分:取步骤(2)所得的中间清液在70-100℃水浴中加 热,加热过程中搅拌使受热均匀,加热后,离心去除沉淀,取上层清液备用;
(4)脱盐、冻干:将步骤(3)所得的上层清液用截留分子量为3500~10000kDa 的超滤膜过滤除盐,再溶解于溶解液中,冷冻干燥,即得所述蝇蛆耐热蛋白提 取物;所述溶解液为pH6~10的磷酸二氢钠-磷酸氢二钠的缓冲溶液,其中含有 质量分数为0.1%~10%的氯化钠。
2.根据权利要求1所述的蝇蛆耐热蛋白提取物的制备方法,其特征在于, 步骤(2)所述提取液为pH7~9的磷酸二氢钠-磷酸氢二钠的缓冲溶液,其中含 有体积分数为1%~2%的甘油,质量分数为0.5%~1.5%的氯化钠,9~10mmol/L乙 二胺四乙酸二钾,体积分数为0.5%~1.5%的β-巯基乙醇。
3.根据权利要求1或2任一项所述的蝇蛆耐热蛋白提取物的制备方法,其 特征在于,步骤(2)所述加入提取液的重量为蝇蛆重量的1-20倍,匀浆的温度 为0-8℃,离心的温度为0-8℃,离心转速为10000~20000rpm,离心时间为 10~50min。
4.根据权利要求3所述的蝇蛆耐热蛋白提取物的制备方法,其特征在于, 步骤(2)所述加入提取液的重量为蝇蛆重量的4-6倍,匀浆的温度为3-5℃,离 心的温度为3-5℃,离心转速为14000~16000rpm,离心时间为45~50min。
5.根据权利要求1或2所述的蝇蛆耐热蛋白提取物的制备方法,其特征在 于,步骤(3)所述水浴中加热的温度为90-100℃,加热时间为1-20min。
6.根据权利要求1或2所述的蝇蛆耐热蛋白提取物的制备方法,其特征在 于,步骤(4)所述溶解液为pH为6~7的磷酸二氢钠-磷酸氢二钠的缓冲溶液, 其中含有质量分数为0.5%~1%的氯化钠。
7.根据权利要求1或2所述的蝇蛆耐热蛋白提取物的制备方法,其特征在 于,步骤(4)所述超滤膜为截留分子量为3500~4000kDa的超滤膜,所述冷冻 干燥的真空度为10~100Pa,温度为-30℃~-70℃。
8.一种由权利要求1-7任一项所述的制备方法制备得到的蝇蛆耐热蛋白提 取物。
9.权利要求8所述的蝇蛆耐热蛋白提取物在制备防治腹泻的药物中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述药物的剂型为胶囊剂、 片剂、丸剂或颗粒剂。
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