[发明专利]艰难梭菌毒素A/B的荧光定量PCR检测试剂盒及检测方法

权利要求书

1.一种检测艰难梭菌的引物对，其特征在于：所述引物对的上游引物具有 如SEQIDNO：1所示的序列，所述引物对的下游引物具有如SEQIDNO：2所 示的序列。

2.一种检测艰难梭菌毒素A的引物对，其特征在于：所述引物对的上游引 物具有如SEQIDNO：3所示的序列，所述引物对的下游引物具有如SEQIDNO： 4所示的序列。

3.一种检测艰难梭菌毒素A的寡核苷酸探针，其特征在于：所述探针具有 如SEQIDNO：5所示的序列或其互补序列。

4.根据权利要求3所述的检测艰难梭菌毒素A的寡核苷酸探针，其特征在 于：在寡核苷酸的5＇末端结合有荧光物质，在3＇末端结合有淬灭物质。

5.根据权利要求4所述的检测艰难梭菌毒素A的寡核苷酸探针，其特征在 于：所述荧光物质为FAM、HEX、TET、JOE、VIC、ROX中的至少一种；所 述淬灭物质为TAMRA、BHQ1、BHQ2、BHQ3、DABCYL中的至少一种。

6.一种检测艰难梭菌毒素A的寡核苷酸组，其特征在于：其具有权利要求 2所述的检测艰难梭菌毒素A的引物对和权利要求3所述的检测艰难梭菌毒素A 的寡核苷酸探针。

7.一种检测艰难梭菌毒素B的引物对，其特征在于：所述引物对的上游引 物具有如SEQIDNO：6所示的序列，所述引物对的下游引物具有如SEQIDNO： 7所示的序列。

8.一种检测艰难梭菌毒素B的寡核苷酸探针，其特征在于：所述探针具有 如SEQIDNO：8所示的序列或其互补序列。

9.根据权利要求8所述的检测艰难梭菌毒素B的寡核苷酸探针，其特征在 于：在寡核苷酸的5＇末端结合有荧光物质，在3＇末端结合有淬灭物质。

10.根据权利要求9所述的检测艰难梭菌毒素B的寡核苷酸探针，其特征 在于：所述荧光物质为FAM、HEX、TET、JOE、VIC、ROX中的至少一种； 所述淬灭物质为TAMRA、BHQ1、BHQ2、BHQ3、DABCYL中的至少一种。

11.一种检测艰难梭菌毒素B的寡核苷酸组，其特征在于：其具有权利要 求7所述的检测艰难梭菌毒素B的引物对和权利要求8所述的检测艰难梭菌毒 素B的寡核苷酸探针。

12.一种特异性扩增艰难梭菌毒素A基因的引物对，其特征在于：其具有 外侧引物对和内侧引物对；

所述外侧引物对的上游引物具有如SEQIDNO：9所示的序列，所述引物对 的下游引物具有如SEQIDNO：10所示的序列；

所述内侧引物对的上游引物具有如SEQIDNO：11所示的序列，所述引物 对的下游引物具有如SEQIDNO：12所示的序列。

13.一种特异性扩增艰难梭菌毒素B基因的引物对，其特征在于：其具有 外侧引物对和内侧引物对；

所述外侧引物对的上游引物具有如SEQIDNO：13所示的序列，所述引物 对的下游引物具有如SEQIDNO：14所示的序列；

所述内侧引物对的上游引物具有如SEQIDNO：15所示的序列，所述引物 对的下游引物具有如SEQIDNO：16所示的序列。

14.一种艰难梭菌毒素A/B的探针法荧光定量PCR检测试剂盒，其特征 在于：其包括权利要求6所述的检测艰难梭菌毒素A的寡核苷酸组和权利要求 11所述的检测艰难梭菌毒素B的寡核苷酸组。

15.如权利要求14所述的艰难梭菌毒素A/B的探针法荧光定量PCR检测 试剂盒，其特征在于：其还包括权利要求1所述的检测艰难梭菌的引物对。

16.如权利要求14所述的艰难梭菌毒素A/B的探针法荧光定量PCR检测 试剂盒，其特征在于：其还包括艰难梭菌毒素A和艰难梭菌毒素B的阳性质控 品，所述艰难梭菌毒素A的阳性质控品具有如SEQIDNO：17所示的序列，所 述艰难梭菌毒素B的阳性质控品具有如SEQIDNO：18所示的序列。