[发明专利]用于Ion Proton测序平台的TN5建库的引物组、试剂盒和建库方法有效
申请号: | 201610040290.1 | 申请日: | 2016-01-21 |
公开(公告)号: | CN105524920B | 公开(公告)日: | 2018-10-02 |
发明(设计)人: | 王磊;李贵波;禹奇超 | 申请(专利权)人: | 深圳华大基因研究院 |
主分类号: | C12N15/11 | 分类号: | C12N15/11;C40B50/06 |
代理公司: | 深圳鼎合诚知识产权代理有限公司 44281 | 代理人: | 孙银行;罗瑶 |
地址: | 518083 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 ion proton 平台 tn5 引物 试剂盒 方法 | ||
1.一种用于Ion Proton测序平台的TN5建库的引物组,其特征在于,所述引物组包括用于接头包埋的SEQ ID NO:1-3所示的序列,以及用于PCR扩增的SEQ ID NO:4-5所示的序列。
2.根据权利要求1所述的引物组,其特征在于,所述引物组还包括用于PCR扩增的SEQID NO:6-7所示的序列。
3.根据权利要求1或2所述的引物组,其特征在于,所述用于PCR扩增的SEQ ID NO:5所示的序列具体为:SEQ ID NO:8-23所示的序列。
4.一种用于Ion Proton测序平台的TN5建库的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1-3任一项所述的引物组。
5.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括TN5转座酶,以及用于TN5转座酶的缓冲液。
6.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括用于PCR扩增的聚合酶,以及用于所述聚合酶的缓冲液。
7.一种用于Ion Proton测序平台的TN5建库方法,其特征在于,所述方法包括:使用SEQID NO:1-3所示的序列与TN5转座酶进行接头包埋;使用得到的包埋复合体对DNA进行片段化处理;使用SEQ ID NO:4-5所示的序列对片段化产物进行PCR扩增;以及对PCR扩增产物进行纯化。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述方法还包括:在PCR扩增过程中还使用SEQ ID NO:6-7所示的序列。
9.根据权利要求7或8所述的方法,其特征在于,所述SEQ ID NO:5所示的序列具体为:SEQ ID NO:8-23所示的序列。
10.根据权利要求7或8所述的方法,其特征在于,所述片段化处理的DNA的起始量是1ng至50ng。
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