[发明专利]基于磁珠法提取血液基因组DNA的试剂盒及其使用方法

权利要求书

1.一种基于磁珠法提取血液基因组DNA的试剂盒，其特征在于，包括有 分别独立分装的细胞裂解液、蛋白酶k溶液、磁珠分散液、第一清洗液、第 二清洗液和洗脱液；

其中，所述细胞裂解液包括有胍类化合物、氯化钠和吐温20；所述胍类 化合物选自盐酸胍、异硫酸氰胍或其组合；

所述磁珠分散液中的磁珠采用内核为超顺磁性四氧化三铁，表面包覆有 硅羟基，粒径为200-800nm的磁珠；

所述第一清洗液包括有Tris碱、EDTA、异丙醇和水；

所述第二清洗液为乙醇溶液；

所述洗脱液为Tris碱或去离子水。

2.如权利要求1所述的基于磁珠法提取血液基因组DNA的试剂盒，其特 征在于，所述细胞裂解液中胍类化合物的浓度为5-7mol/L，氯化钠的浓度为 0.2-0.5mol/L，吐温20的体积分数为0.5％-2％。

3.如权利要求1所述的基于磁珠法提取血液基因组DNA的试剂盒，其特 征在于，所述磁珠分散液为磁珠浓度为20-40μg/μL的去离子水溶液。

4.如权利要求1所述的基于磁珠法提取血液基因组DNA的试剂盒，其特 征在于，所述第一清洗液中Tris碱的浓度为30-100mmol/L，EDTA的浓度为 6-20mmol/L，异丙醇的体积分数为45％-65％。

5.如权利要求1所述的基于磁珠法提取血液基因组DNA的试剂盒，其特 征在于，当所述洗脱液为Tris碱时，Tris碱的浓度为0.9-1.1mmol/L。

6.一种使用如权利要求1-5中任一项所述的基于磁珠法提取血液基因组 DNA的试剂盒的提取方法，其特征在于，包括：

步骤一：向反应容器中依次加入待测血样、蛋白酶k溶液和细胞裂解液， 置于涡旋振荡器上混合充分，随后在55-60℃下裂解8-10分钟；

步骤二：向反应容器中依次加入磁珠分散液和异丙醇，置于涡旋振荡器 上混合充分，随后将反应容器置于磁板架上静置直至磁珠吸附完全，除去清 液；

步骤三：依次使用第一清洗液和第二清洗液对磁珠进行清洗；

步骤四：将磁珠置于45℃真空烘箱中真空干燥3-5分钟，取出，加入洗 脱液，置于涡旋振荡器上充分混合，随后置于55-60℃中静置5min；

步骤五：将磁珠与洗脱液分离，即获得含目标DNA的洗脱液。

7.如权利要求6所述的基于磁珠法提取血液基因组DNA的试剂盒的提取 方法，其特征在于，所述反应容器为48孔板。