[发明专利]一种从兔皮中提取胶原蛋白的方法在审
申请号: | 201510365884.5 | 申请日: | 2015-06-29 |
公开(公告)号: | CN104894202A | 公开(公告)日: | 2015-09-09 |
发明(设计)人: | 张宇昊;王雪蒙;马良;于玮;李洪军;贺稚非 | 申请(专利权)人: | 西南大学 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/30 |
代理公司: | 北京同恒源知识产权代理有限公司 11275 | 代理人: | 赵荣之 |
地址: | 400715*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 兔皮 提取 胶原 蛋白 方法 | ||
1.一种从兔皮中提取胶原蛋白的方法,其特征在于,具体步骤如下:
(1)兔皮预处理:将兔皮洗净、除皮下脂肪、脱毛、切块,去除杂蛋白,再用水洗净;
(2)酸浸泡:取步骤(1)处理过的兔皮与pH值为1.85~1.95的醋酸混合浸泡8~10h,所述兔皮与醋酸的质量体积比为1:14~16;
(3)酶解:将步骤(2)处理的兔皮打碎呈浆状,再继续添加pH值为1.85~1.95的醋酸搅拌均匀,兔皮与醋酸的质量体积比为1:29~31,以兔皮质量计,添加0.095%~1.005%的胃蛋白酶,于3~5℃温度条件下酶解230-250min,过滤得滤液;
(4)盐析:向滤液中加入NaOH调节pH至7~8,再加入NaCl至浓度为4~5mol/L,进行盐析12h;
(5)离心:盐析物离心,取沉淀物,再加水离心直至充分去除NaCl,取沉淀,即得到胶原蛋白粗提物;
(6)冻干:将胶原蛋白粗提物冻干,得到纯化的胶原蛋白。
2.根据权利要求1所述从兔皮中提取胶原蛋白的方法,其特征在于:所述步骤(1)兔皮预处理中,将兔皮切成3mm×3mm块状。
3.根据权利要求1所述从兔皮中提取胶原蛋白的方法,其特征在于,所述步骤(3)酶解过程中,添加pH值为1.9的醋酸搅拌均匀,兔皮与醋酸的质量体积比为1:30,以兔皮质量计,添加1%的胃蛋白酶,于4℃温度条件下酶解240min。
4.根据权利要求1所述从兔皮中提取胶原蛋白的方法,其特征在于,步骤(1)所述去除杂蛋白方式为:以质量体积比1:4~6将兔皮和质量分数为1%的NaCl溶液混合,浸泡350~370min,每120min换一次液。
5.根据权利要求1所述从兔皮中提取胶原蛋白的方法,其特征在于:步骤(5)在转速为5000r/min条件下每次离心10min。
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