[发明专利]一种快速获得日本结缕草组培苗的方法

权利要求书

1.一种快速获得日本结缕草组培苗的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)将灭菌的日本结缕草种子以水浸种3天；

2)浸种后的种子吹干至表面发白，以刚没过种子的水培养至萌发出1-2mm的芽；

3)将萌芽后的种子接种到固体MS培养基上，培养至幼苗地上部高3cm，此时幼苗叶鞘底部出现表面粗糙的节点；

4)剥去幼苗上的种皮，沿节点上沿切断幼苗，注意保留节点，去除节点以上的茎叶，将余下的植株放到ZJ-SM培养基上，培养至茎端长出芽；

5)去除茎端长出的芽，将植株放回ZJ-SM培养基上继续培养至根端长出芽；

6)将根端长出的芽切下放到固体1/2MS培养基上培养至长出5cm长的根，得到完整的植株；

7)将完整的植株炼苗后移植，得到日本结缕草组培苗；

所述ZJ-SM培养基为含激动素的浓度为1.0-8.0μmol/L、2,4-D的浓度为0.1μmol/L，蔗糖质量百分含量为2％、植物凝胶的含量为0.3％(w/v)的固体MS培养基。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的水为无菌水。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)所述灭菌的方法为：将种子加入灭菌液后搅拌40min，用水漂洗3-5次后去除表面水分。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述去除表面水分，为吹干或用无菌滤纸吸干水分。

5.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述灭菌液为Tween-20含量为2.500ml/L、次氯酸钠原液含量为250ml/L的水溶液。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述ZJ-SM培养基为含激动素的浓度为4.0-6.0μmol/L、含2,4-D的浓度为0.1μmol/L，蔗糖质量百分含量为2％、植物凝胶的含量为0.3％(w/v)的固体MS培养基。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述ZJ-SM培养基为含激动素的浓度为4.0μmol/L、含2,4-D的浓度为0.1μmol/L，蔗糖质量百分含量为2％、植物凝胶的含量为0.3％(w/v)的固体MS培养基。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)所述培养至萌发出1-2mm的芽，所需时间为3天；步骤3)所述培养至幼苗株高3cm，所需时间为12天；步骤4)所述培养至茎端长出芽，所需的时间为4天；步骤5)所述培养至根端长出芽，所需的时间为15天；步骤6)所述培养至长出5cm长的根，所需的时间为10天；步骤7)所述炼苗，所需时间为3天。

9.权利要求1-8任一项所述的方法在日本结缕草良种繁育中的应用。