[发明专利]一种青霉素类化合物化学筛选去重复方法

说明书

技术领域

本发明属于天然药物分离筛选去重复技术领域，尤其涉及一种青霉素类化合物化学筛选去重复方法。

背景技术

当前天然药物创新遭遇瓶颈：重复发现率达99.9％，去重复显得尤为重要。LC-MS等前景好的去重复方法须借助昂贵的仪器，专业性强，常独立于具体天然产物分离之外。

薄层色谱(Thin Layer Chromatography，TLC)，又称薄层层析，是一种微量、快速而简单的色谱法，它兼有柱色谱和纸色谱的优点，具有设备和操作简单、花费最低、展开时间短、检验灵敏度高、多通道多维检测、可不连续的离线操作、能衍生化、结果直观等优点，主要用于微量样品快速分离和定性分析。

现行TCL定性必须随行对照品，经过两种以上不同组成的展开剂展开，Rf均与对照品一致时，才可以认定该斑点与对照品是同一化合物。这些定性鉴定过程仍处于经验过程中，而且随行对照品经常不可得，最终的定性鉴定效果不理想。

德国HKI研究所利用TLC数据库，对8000个微生物来源的粗提物进行筛选，从中筛选分离出259个化合物，其中129个为新结构化合物，但其排重方法和数据库未见报道。在没有随行对照的情况下，如果建立一定标准化操作(SOP),原则上，每增加一组展开剂或增加一种衍生化检测方法，就增加一些鉴定的比对信息，展开剂越多，比对信息越多，鉴定越准确。

发明内容

本发明的目的在于提供一种青霉素类化合物化学筛选去重复方法，旨在解决目前青霉素类化合物去重复定性鉴定效果不理想的问题。

本发明是这样实现的，一种青霉素类化合物化学筛选去重复方法，包括以下步骤：

S1、在标准化操作程序SOP下，建立已知青霉素类化合物的展开数据库，在SOP下展开未知样品；

S2、计算未知样品在展开剂下，含有所有已知化合物的最大概率，然后计算所有展开条件下含有已知化合物的最小的最大概率；

S3、将所述最小的最大概率分别和阈值进行比较，判断是否含有未知化合物。

优选地，在步骤S1中，已知青霉素(β-内酰胺)化合物在标准化操作程序SOP操作下展开，R_f及其分布规律包含：9种青霉素(β-内酰胺)13种展开剂展开R_f值，其中，每种青霉素在不同展开剂(zkj)下R_f值，服从N(R_f，0.05²)分布，各个展开剂下R_f值相互独立。

优选地，在步骤S2中，在步骤S2中，所述已知化合物的最小的最大概率计算过程包括以下具体步骤：

1)在SOP下按多种展开剂展开，记录条带数及每个条带的R_f值；

2)分别计算TLC每个条带属于所有已知化合物的概率；

3)分别找出属于所有已知化合物最大概率的条带，并记录该最大概率值；

4)重复步骤1)、2)，计算所有展开剂展开下属于所有已知化合物最大概率的条带，并记录该最大概率值；

5)分别取各个展开剂各个已知化合物概率最小值；

6)计算包含所有物质(X1,X2,…,Xi,…,Xb)最小(Min(g1)，Min(g2)，…，Min(gj)，…，Min(gb))的最大概率值Minmax。

相比与现有技术的缺点和不足，本发明具有以下有益效果：本发明基于TLC去青霉素化合物重复，不仅具有设备和操作简单、花费最低、展开时间短、检验灵敏度高、多通道多维检测、可不连续的离线操作、能衍生化、结果直观等优点，而且去重复定性鉴定效果良好。

附图说明

图1是本发明青霉素类化合物化学筛选去重复方法一实施例的步骤流程图；

图2是本发明青霉素类化合物化学筛选去重复方法用Matlab编写的脚本表示的去重复过程示意图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

一种青霉素类化合物化学筛选去重复方法，如图1所示，包括以下步骤：

S1、在标准化操作程序SOP下，建立已知青霉素类化合物的展开数据库，在SOP下展开未知样品

在步骤S1中，建立数据库及SOP，如下表所示：

表1