[发明专利]鉴定龟甲的PCR特异引物及其检测方法有效
| 申请号： | 201410119005.6 | 申请日： | 2014-03-28 |
| 公开（公告）号： | CN104946729B | 公开（公告）日： | 2019-11-15 |
| 发明（设计）人： | 黄璐琦;袁媛;蒋超;李曼 | 申请（专利权）人： | 中国中医科学院中药研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12N15/11 |
| 代理公司： | 11245 北京纪凯知识产权代理有限公司 | 代理人： | 关畅<国际申请>=<国际公布>=<进入国 |
| 地址： | 100700北京*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 鉴定 龟甲 pcr 特异 引物 及其 检测 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种鉴定龟甲的特异引物F1、F2，其序列为：
F1：5′-TTTGGAAACTGACTTGTACCTTTAACG-3′
F2：5′-GAGTAGTAATAGGACGGCTGTAATAAGTAGA-3′。
2.一种龟甲的PCR鉴定方法，其特征在于，包括下列步骤：
a)从所述材料中提取得到DNA样品；
b)用权利要求1所述的引物进行PCR反应，PCR反应参数为95℃预变性5min后，进行30次循环，循环参数为95℃30s，55-65℃45s，后延伸72℃5min，获得扩增产物；
c)电泳所述扩增产物，如果存在分子量360bp的单一DNA条带，则确定所检材料为龟甲；
d)直接在所述扩增产物中加入2μL20×SYBR Green I染料，振荡30s充分混匀，于365nm紫外灯下检测PCR产物；如果反应产物发出强烈绿色荧光，则确定所检材料为龟甲。
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