[发明专利]用于处理细胞群体的材料和方法

说明书

相关申请

本申请要求于2013年6月20日提交的题为“用于处理细胞群体的材料和方法(MATERIALS AND METHODS FOR PROCESSING CELL POPULATIONS)”的美国临时专利申请61/662,246的优先权，在允许的情况下通过引用将其整体并入本文。

发明背景

存在许多用于从异质细胞群体富集目的细胞的材料和方法。例如，荧光活化的细胞分选(FACS)是专门类型的流式细胞术，其中可基于光散射或荧光性质分选窄的个体细胞流。再例如，已经使用了微流装置来富集细胞。由于例如在处理期间细胞粘附至表面，这些现有技术可能表现出显著的细胞损伤或损失。在从异质细胞群体中富集稀有细胞时，可能特别不期望该细胞损失。因此，存在改进用于从异质细胞混合物富集目的细胞的材料和方法的需求。

发明概述

本文公开的一些实施方案包括方法。所述方法可包括：获得分散于细胞相容基质中的细胞群体；向所述细胞群体施加标记物以将目的细胞与细胞群体的一种或多种细胞区分开来；以及鉴定包含所述目的细胞的细胞相容基质部分。

在一些实施方案中，所述方法还包括分离包含所述目的细胞的细胞相容基质部分。

在一些实施方案中，所述细胞相容基质包含聚合物。在一些实施方案中，所述细胞相容基质包含水凝胶。

在一些实施方案中，所述细胞群体是异质的。在一些实施方案中，所述细胞群体得自血液样品，在一些实施方案中，所述血液样品来自孕妇。在一些实施方案中，所述细胞群体包含母体细胞和胎儿细胞。在一些实施方案中，所述目的细胞是胎儿细胞。在一些实施方案中，所述目的细胞是癌细胞。在一些实施方案中，所述目的细胞是干细胞。

在一些实施方案中，获得分散于细胞相容基质中的细胞群体包括将所述细胞群体与包含聚合物的组合物合并，并交联所述聚合物以形成所述细胞相容基质。在一些实施方案中，交联所述聚合物以形成所述细胞相容基质包括向所述聚合物施加辐射、加热所述聚合物、调节所述组合物的pH，或将交联剂与所述组合物合并。

在一些实施方案中，将所述标记物施加至所述细胞群体包括在将所述细胞群体分散于所述细胞相容基质中之前将所述标记物与所述细胞群体合并。在一些实施方案中，将所述标记物施加至所述细胞群体包括在交联所述聚合物后将所述标记物与所述细胞群体合并。

在一些实施方案中，获得分散于所述细胞相容基质中的细胞群体包括将所述细胞群体与包含单体的组合物合并，并聚合所述单体以形成所述细胞相容基质。

在一些实施方案中，所述细胞相容基质包含选自以下的聚合物：聚(环氧烷烃)、淀粉、纤维素、多糖、聚氨酯、聚乙烯醇、聚乙烯醚、聚丙烯酸酯、聚乙烯吡咯烷酮、聚酯、聚丙烯酰胺、聚乙醇酸、聚乳酸、蛋白质、以上物质的共聚物及以上物质的衍生物。

在一些实施方案中，所述细胞相容基质是透光的。在一些实施方案中，所述细胞相容基质对可见光具有至少约50％的透光率。在一些实施方案中，所述细胞相容基质具有至少约50cP的粘度。在一些实施方案中，所述细胞相容基质是多孔的。在一些实施方案中，所述细胞相容基质是光可降解的或可酶促降解的。在一些实施方案中，所述细胞相容基质在近平衡条件下具有小于约500的质量溶胀比(mass swelling ratio)。

在一些实施方案中，将一种或多种标记物施加至所述细胞群体包括将所述标记物施加至包含所述细胞群体的所述细胞相容基质的表面。在一些实施方案中，所述标记物中的至少一种鉴定细胞表面标志物或者细胞内标志物或结构。在一些实施方案中，所述细胞内标志物是核酸标志物或蛋白质标志物。在一些实施方案中，所述标记物中的至少一种是抗体。在一些实施方案中，所述标记物是染色剂，优选鉴定细胞结构的染色剂。在一些实施方案中，所述染色剂是核染色剂，例如苏木精、中性红/二苯乙烯红或尼罗蓝。

在一些实施方案中，所述方法包括将至少两种标记物施加至所述细胞群体。在一些实施方案中，将第一标记物和第二标记物施加至所述细胞群体，所述第一标记物被配置用于鉴定细胞表面标志物，并且所述第二标记物被配置用于鉴定细胞内标志物或结构。

在一些实施方案中，所述标记物中的至少一种是荧光标记的或放射性标记的。在一些实施方案中，所述标记物中的至少一种包含磁性颗粒或顺磁颗粒。

在一些实施方案中，所述标记物中的至少一种鉴定胎儿细胞的标志物。在一些实施方案中，所述胎儿细胞的标志物选自CD71、CD34、CD45和CD235a。