[发明专利]一种生物碱类化合物的制备方法及其在制备抑制钙离子通道药物中的应用

权利要求书

1.一种如式（1）所示的生物碱类化合物Methyl saphenate的制备方法，其特征在于，如式（1）所示的生物碱类化合物Methyl saphenate是从海洋放线菌Streptomyces nigrescens SCSIO ZJ49的发酵培养物中制备的；

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，具体步骤为：

a、将海洋放线菌Streptomyces nigrescens SCSIO ZJ49的发酵产物的上清发酵液和菌丝体分离开，上清发酵液用丁酮萃取，丁酮萃取液浓缩得发酵液浸膏；菌丝体用丙酮萃取，丙酮萃取液浓缩得菌体浸膏，合并发酵液浸膏和菌体浸膏得浸膏；

b、浸膏经正相硅胶柱层析，以氯仿/甲醇为洗脱剂，从体积比100/0，98/2梯度洗脱，顺序得馏分A1-A2，合并馏分A1，A2，经正向硅胶柱层析，以石油醚/乙酸乙酯为洗脱剂，从体积比100/0，80/20，70/30梯度洗脱，顺序得馏分B1-B3，合并B2和B3，经反相中压层析纯化后得到化合物Methyl saphenate。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的反相中压层析，其层析条件为：流速10mL/min，检测波长236nm，A相-水，B相-甲醇，0～50min，A/B：80/20～15/85进行线性梯度洗脱；50-60min以100%B相进行等梯度洗脱，收集在52min出峰的组分，旋蒸干燥，重复上述反相中压层析，经二次纯化后，得到纯品化合物Methyl saphenate。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的海洋放线菌Streptomyces nigrescens SCSIO ZJ49的发酵产物是通过以下方法制备的：

将海洋放线菌Streptomyces nigrescens SCSIO ZJ49接入种子培养基中，28℃，200rpm，培养36h得种子培养液；将种子培养液接入放大发酵培养基中，28℃，200rpm，培养7天，获得海洋放线菌Streptomyces nigrescens SCSIO ZJ49的发酵产物；所述放大发酵培养基和种子培养基都为AM2ab发酵培养基，其以质量分数100%计，包括：可溶性淀粉0.5%，大豆粉0.5%，酵母提取粉0.2%，蛋白胨0.2%，K₂HPO₄ 0.05%，MgSO₄·7H₂O 0.05%，NaCl 0.4%，粗海盐0.3%，CaCO₃ 0.2%，pH7.2-7.4，余量为水。

5.如式（1）所示的生物碱类化合物Methyl saphenate在制备抑制钙离子通道药物中的应用；

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的抑制钙离子通道药物是抑制L-型电压门控性钙离子通道药物。

7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的抑制钙离子通道药物为治疗钙通道依赖性心律失常、心绞痛或高血压的药物。

8.海洋放线菌Streptomyces nigrescens SCSIO ZJ49在制备生物碱类化合物Methyl saphenate中的应用。

9.海洋放线菌Streptomyces nigrescens SCSIO ZJ49，其保藏编号为：CGMCC NO.7864。