[发明专利]在大肠杆菌构建5-氨基乙酰丙酸C4生物合成途径的基因及其构建方法

权利要求书

1.一种在大肠杆菌构建5-氨基乙酰丙酸C4生物合成途径的基因，其特征在于借助pETDuet-1载体，共表达三个基因：ALA合成酶基因hemA、辅酶A转移酶基因cat和ALA分泌基因YBi，所述基因序列如下：

ggggaattgt gagcggataa caattcccct ctagaaataa ttttgtttaa ctttaagaag    

gagatatacc atgggcagca gccatcacca tcatcaccac agccaggatc cgaattcatg    

gactacaatc tggcactcga taccgctctg aaccggctcc ataccgaggg ccggtaccgg    

accttcatcg acatcgagcg gcgcaagggt gccttcccga aagccatgtg gcgcaagccc    

gacgggagcg agaaggaaat caccgtctgg tgcggcaacg actatctcgg catgggccag    

catccggtgg tgctgggggc catgcacgag gcgctggatt cgaccggcgc cgggtcgggc    

ggcacgcgca acatctcggg caccacgctc tatcacaagc gcctcgaggc cgagctcgcc    

gacctgcacg gcaaggaagc ggcgctggtc ttctcgtcgg cctatatcgc caacgacgcg    

accctctcga cgctgccgca gctgatcccg ggcctcgtca tcgtctcgga caagttgaac    

cacgcttcga tgatcgaggg catccgccgc tcgggcaccg agaagcacat cttcaagcac    

aatgacctcg acgacctgcg ccggatcctg acctcgatcg gcaaggaccg tccgatcctc    

gtggccttcg aatccgtcta ttcgatggat ggcgacttcg gccgcatcga ggagatctgc    

gacatcgccg acgagttcgg cgcgctgaaa tacatcgacg aggtccatgc cgtcggcatg    

tacggccccc gcggcggcgg cgtggccgag cgggacgggc tgatggaccg gatcgacatc    

atcaacggga cgctgggcaa ggcctatggc gtgttcggcg gctatatcgc ggcctcgtca    

aagatgtgcg acgcggtgcg ctcctacgcg ccgggcttca tcttctcgac ctcgctgccg    

cccgtcgtgg cggccggtgc ggcggcctcg gtgcgccacc tcaagggcga tgtggagctg    

cgcgagaagc accagaccca ggcccgcatc ctgaagatgc gcctcaaggg gctcggcctg    

ccgatcatcg accacggctc gcacatcgtg ccggtccatg cgggcgaccc cgtgcactgc    

aagatgatct cggacatgct gctcgagcat ttcggcatct atgtccagcc gatcaacttc    

ccgaccgtgc cgcgcgggac cgagcggctg cgcttcaccc cgtcgcccgt gcatgattcc    

ggcatgatcg atcacctcgt gaaggccatg gacgtgctct ggcagcactg tgcgctgaat    

cgcgccgagg tcgttgcctg agcggccgcg ccgcataatc gaaattaata cgactcacta    

taggggaatt gtgagcggat aacaattccc catcttagta tattagttaa gtataagaag    

gagatataat gcctggttca ttacgtaaaa tgccggtctg gttaccaata gtcatattgc    

tcgttgccat ggcgtctatt cagggtggag cctcgttagc taagtcactt tttcctctgg    

tgggcgcacc gggtgtcact gcgctgcgtc tggcattagg aacgctgatc ctcatcgcgt    

tctttaagcc atggcgactg cgctttgcca aagagcaacg gttaccgctg ttgttttacg    

gcgtttcgct gggtgggatg aattatcttt tttatctttc tattcagaca gtaccgctgg    

gtattgcggt ggcgctggag ttcaccggac cactggcggt ggcgctgttc tcttctcgtc    

gcccggtaga ttccgtctgg gttgtgctgg cggttcttgg tctgtggttc ctgctaccgc    

tggggcaaga cgtttcccat gtcgatttaa ccggctgtgc gctggcactg ggggccgggg    

cttgttgggc tatttacatt ttaagtgggc aacgcgcagg agcggaacat ggccctgcga    

cggtggcaat tggttcgttg attgcagcgt taattttcgt gccaattgga gcgcttcagg    

ctggtgaagc actctggcac tggtcggtta ttccattggg tctggctgtc gctattctct    

cgaccgctct gccttattcg ctggaaatga ttgccctcac ccgtttgcca acacggacat    

ttggtacgct gatgagcatg gaaccggcgc tggctgccgt ttccgggatg attttcctcg    

gagaaacact gacacccata cagctactgg cgctcggcgc tatcatcgcc gcttcaatgg    

ggtctacgct gacagtacgc aaagagagca aaataaaaga attagacatt aattaagcgg    

ccgcataatg cttaagtcga acagaaagta atcgtattgt acacggccgc ataatcgaaa    

ttaatacgac tcactatagg ggaattgtga gcggataaca attccccatc ttagtatatt    

agttaagtat aagaaggaga tatacatatg atgaacgaac gcatctccaa cgagaagttg    

cgcggaaaga tcatgaccgc cgatgaggcc gcagccctta tccccaatgg agcccagatc    

ggcttcggcg gtttcaccgg ctcgggttac ccgaaggaac tgccccaggc cctggccaac    

aggatcaagg cagcccacga gcgcggcgag gaattcaccg tcaacgcgtt caccggtgcg    

tccaccgctc ccgagctcga tggtgccctg gccggcgtcg atggcatgca ctaccgcatg    

ccgtaccagt cggatccgac gctgcgcaag aagatcaacg acggcaccac gctgtacacc    

gacatccacc tgtcgcactc ggcccagctg gtggccgagg gcttcatggg caagctcgac    

ttcgccgtgg tcgaggccgt gcgcatcacc gaggacggga acatcgttcc cacctcgtcg    

gtgggcaaca acaagaccta cctcgacatg gccgagaaga tcatcatcga ggtgaactcc    

tggcagtcgc ccgacctcga gggaatgcac gatatctgga atggatatct gactcccccg    

aaccgtccga tcatcccgat caacaatgtg ggcgaccgca tcggcgacac cttcctgacc    

atcgattccg acaaggtcgt ggcggtcatc gagaccaccg accgtgaccg caactcgccg    

ttcaagccga ttgacgacga ttcgcgcgcc attgccggct acctgctcga cttctatgcc    

aacgaggtca agcacggccg cctgccgaag aacctgctgc cgctgcagtc cggcgtgggc    

aatatcccca acgccgtgct cgacggcctg ctgcattccg acctcgagaa cctcaccagc    

tacaccgagg tgatccagga cggcatggtc gacctgatcg acgccggcaa gctggccgtc    

gcctcggcaa cggccttctc gctgagcccc gattacgcgc acaacatgaa tgagaacgcg    

aagaactacc gcaagtcgat cgttcttcgt ccccaggaga tctcgaacca tcctgaggtc    

atccgtcgcc tgggcgtgct gtcgtgcaat ggcatgatcg aggccgacat ctacggcaat    

gtgaactcca cccacgtgat gggcacccgc atgatgaacg gcatcggtgg ttccggtgac    

ttcacgcgca acgcctacat ctcggcattc gtgtcgccgt cgaccgccaa ggacggcgcc    

atctcggcga tcgtgccgat ggtgagccac gtcgaccaca ccgagcatga cgtgatggtg    

atcatcaccg agcagggcat cgccgacctc cgtggcctgg caccgcgcct gcgcgcccag    

aagatcatcg acaattgcgt gcatcccgat ttccgtgcgc agctgcagga gtacttcgac    

cactcgctgg tgacgtcgaa ggccaagcac acgccgcacg acctgcgcca ttcctacgat    

tggcacctga acttcatcga gaacggcacg atgaagcttt cgcactaccg ttgacatatg   

gcagatctca attggatatc ggccggccac gcgatcgctg acgtcggtac cctcgagtct    

ggtaaagaaa ccgctgctgc gaaatttgaa cgccagcaca tggactcgtc tactagcgca    

gcttaattaa cctaggctgc tgccaccgct gagcaataac tagcataacc ccttggggcc    

tctaaacggg tcttgagggg ttttttgctg aaaggaggaa ctatatccgg attggcgaat    

gggacgcgcc ctgtagcggc gcattaagcg cggcgggtgt ggtggttacg cgcagcgtga    

ccgctacact tgccagcgcc ctagcgcccg ctcctttcgc tttcttccct tcctttctcg    

ccacgttcgc cggctttccc cgtcaagctc taaatcgggg gctcccttta gggttccgat    

ttagtgcttt acggcacctc gaccccaaaa aacttgatta gggtgatggt tcacgtagtg    

ggccatcgcc ctgatagacg gtttttcgcc ctttgacgtt ggagtccacg ttctttaata    

gtggactctt gttccaaact ggaacaacac tcaaccctat ctcggtctat tcttttgatt    

tataagggat tttgccgatt tcggcctatt ggttaaaaaa tgagctgatt taacaaaaat    

ttaacgcgaa ttttaacaaa atattaacgt ttacaatttc tggcggcacg atggcatgag    

attatcaaaa aggatcttca cctagatcct tttaaattaa aaatgaagtt ttaaatcaat    

ctaaagtata tatgagtaaa cttggtctga cagttaccaa tgcttaatca gtgaggcacc    

tatctcagcg atctgtctat ttcgttcatc catagttgcc tgactccccg tcgtgtagat    

aactacgata cgggagggct taccatctgg ccccagtgct gcaatgatac cgcgagaccc   

acgctcaccg gctccagatt tatcagcaat aaaccagcca gccggaaggg ccgagcgcag    

aagtggtcct gcaactttat ccgcctccat ccagtctatt aattgttgcc gggaagctag    

agtaagtagt tcgccagtta atagtttgcg caacgttgtt gccattgcta caggcatcgt    

ggtgtcacgc tcgtcgtttg gtatggcttc attcagctcc ggttcccaac gatcaaggcg    

agttacatga tcccccatgt tgtgcaaaaa agcggttagc tccttcggtc ctccgatcgt    

tgtcagaagt aagttggccg cagtgttatc actcatggtt atggcagcac tgcataattc    

tcttactgtc atgccatccg taagatgctt ttctgtgact ggtgagtact caaccaagtc    

attctgagaa tagtgtatgc ggcgaccgag ttgctcttgc ccggcgtcaa tacgggataa   

taccgcgcca catagcagaa ctttaaaagt gctcatcatt ggaaaacgtt cttcggggcg    

aaaactctca aggatcttac cgctgttgag atccagttcg atgtaaccca ctcgtgcacc   

caactgatct tcagcatctt ttactttcac cagcgtttct gggtgagcaa aaacaggaag    

gcaaaatgcc gcaaaaaagg gaataagggc gacacggaaa tgttgaatac tcatactctt    

cctttttcaa tcatgattga agcatttatc agggttattg tctcatgagc ggatacatat    

ttgaatgtat ttagaaaaat aaacaaatag gtcatgacca aaatccctta acgtgagttt    

tcgttccact gagcgtcaga ccccgtagaa aagatcaaag gatcttcttg agatcctttt    

tttctgcgcg taatctgctg cttgcaaaca aaaaaaccac cgctaccagc ggtggtttgt    

ttgccggatc aagagctacc aactcttttt ccgaaggtaa ctggcttcag cagagcgcag    

ataccaaata ctgtccttct agtgtagccg tagttaggcc accacttcaa gaactctgta    

gcaccgccta catacctcgc tctgctaatc ctgttaccag tggctgctgc cagtggcgat    

aagtcgtgtc ttaccgggtt ggactcaaga cgatagttac cggataaggc gcagcggtcg    

ggctgaacgg ggggttcgtg cacacagccc agcttggagc gaacgaccta caccgaactg    

agatacctac agcgtgagct atgagaaagc gccacgcttc ccgaagggag aaaggcggac    

aggtatccgg taagcggcag ggtcggaaca ggagagcgca cgagggagct tccaggggga    

aacgcctggt atctttatag tcctgtcggg tttcgccacc tctgacttga gcgtcgattt    

ttgtgatgct cgtcaggggg gcggagccta tggaaaaacg ccagcaacgc ggccttttta   

cggttcctgg ccttttgctg gccttttgct cacatgttct ttcctgcgtt atcccctgat    

tctgtggata accgtattac cgcctttgag tgagctgata ccgctcgccg cagccgaacg    

accgagcgca gcgagtcagt gagcgaggaa gcggaagagc gcctgatgcg gtattttctc    

cttacgcatc tgtgcggtat ttcacaccgc atatatggtg cactctcagt acaatctgct    

ctgatgccgc atagttaagc cagtatacac tccgctatcg ctacgtgact gggtcatggc   

tgcgccccga cacccgccaa cacccgctga cgcgccctga cgggcttgtc tgctcccggc    

atccgcttac agacaagctg tgaccgtctc cgggagctgc atgtgtcaga ggttttcacc   

gtcatcaccg aaacgcgcga ggcagctgcg gtaaagctca tcagcgtggt cgtgaagcga    

ttcacagatg tctgcctgtt catccgcgtc cagctcgttg agtttctcca gaagcgttaa    

tgtctggctt ctgataaagc gggccatgtt aagggcggtt ttttcctgtt tggtcactga    

tgcctccgtg taagggggat ttctgttcat gggggtaatg ataccgatga aacgagagag    

gatgctcacg atacgggtta ctgatgatga acatgcccgg ttactggaac gttgtgaggg    

taaacaactg gcggtatgga tgcggcggga ccagagaaaa atcactcagg gtcaatgcca    

gcgcttcgtt aatacagatg taggtgttcc acagggtagc cagcagcatc ctgcgatgca    

gatccggaac ataatggtgc agggcgctga cttccgcgtt tccagacttt acgaaacacg    

gaaaccgaag accattcatg ttgttgctca ggtcgcagac gttttgcagc agcagtcgct    

tcacgttcgc tcgcgtatcg gtgattcatt ctgctaacca gtaaggcaac cccgccagcc    

tagccgggtc ctcaacgaca ggagcacgat catgctagtc atgccccgcg cccaccggaa    

ggagctgact gggttgaagg ctctcaaggg catcggtcga gatcccggtg cctaatgagt    

gagctaactt acattaattg cgttgcgctc actgcccgct ttccagtcgg gaaacctgtc    

gtgccagctg cattaatgaa tcggccaacg cgcggggaga ggcggtttgc gtattgggcg    

ccagggtggt ttttcttttc accagtgaga cgggcaacag ctgattgccc ttcaccgcct    

ggccctgaga gagttgcagc aagcggtcca cgctggtttg ccccagcagg cgaaaatcct    

gtttgatggt ggttaacggc gggatataac atgagctgtc ttcggtatcg tcgtatccca   

ctaccgagat gtccgcacca acgcgcagcc cggactcggt aatggcgcgc attgcgccca    

gcgccatctg atcgttggca accagcatcg cagtgggaac gatgccctca ttcagcattt    

gcatggtttg ttgaaaaccg gacatggcac tccagtcgcc ttcccgttcc gctatcggct    

gaatttgatt gcgagtgaga tatttatgcc agccagccag acgcagacgc gccgagacag   

aacttaatgg gcccgctaac agcgcgattt gctggtgacc caatgcgacc agatgctcca   

cgcccagtcg cgtaccgtct tcatgggaga aaataatact gttgatgggt gtctggtcag    

agacatcaag aaataacgcc ggaacattag tgcaggcagc ttccacagca atggcatcct    

ggtcatccag cggatagtta atgatcagcc cactgacgcg ttgcgcgaga agattgtgca    

ccgccgcttt acaggcttcg acgccgcttc gttctaccat cgacaccacc acgctggcac    

ccagttgatc ggcgcgagat ttaatcgccg cgacaatttg cgacggcgcg tgcagggcca    

gactggaggt ggcaacgcca atcagcaacg actgtttgcc cgccagttgt tgtgccacgc    

ggttgggaat gtaattcagc tccgccatcg ccgcttccac tttttcccgc gttttcgcag    

aaacgtggct ggcctggttc accacgcggg aaacggtctg ataagagaca ccggcatact    

ctgcgacatc gtataacgtt actggtttca cattcaccac cctgaattga ctctcttccg    

ggcgctatca tgccataccg cgaaaggttt tgcgccattc gatggtgtcc gggatctcga    

cgctctccct tatgcgactc ctgcattagg aagcagccca gtagtaggtt gaggccgttg    

agcaccgccg ccgcaaggaa tggtgcatgc aaggagatgg cgcccaacag tcccccggcc    

acggggcctg ccaccatacc cacgccgaaa caagcgctca tgagcccgaa gtggcgagcc    

cgatcttccc catcggtgat gtcggcgata taggcgccag caaccgcacc tgtggcgccg    

gtgatgccgg ccacgatgcg tccggcgtag aggatcgaga tcgatctcga tcccgcgaaa    

ttaatacgac tcactata 。