[发明专利]猪链球菌种水平荧光定量PCR检测方法有效
| 申请号： | 201310020452.1 | 申请日： | 2013-01-21 |
| 公开（公告）号： | CN103122383A | 公开（公告）日： | 2013-05-29 |
| 发明（设计）人： | 白雪梅;郑翰;纪少博;刘凯 | 申请（专利权）人： | 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/14;C12Q1/06;C12N15/11;G01N21/64 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王朋飞;张庆敏 |
| 地址： | 102206 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 链球 菌种 水平 荧光 定量 pcr 检测 方法 | ||
【权利要求书】：
1.猪链球菌种水平荧光定量PCR检测引物对和探针，其特征在于，所述引物对包括：
正向引物128-F：5’-AATGCAGGTAGTTCAAGTCTAAAATGG-3’
反向引物128-R：5’-AACCGCAACCGTATGATTAGGA-3’，
所述探针为128-P：5’-FAM-ATCAAATGCCAGAAGAA-MGB-3’。
2.含有权利要求1所述引物对和探针的用于种水平检测猪链球菌的试剂盒。
3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括dNTPs、Taq DNA聚合酶、Mg2+、PCR反应缓冲液中的一种或多种。
4.根据权利要求2或3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括标准阳性模板。
5.一种猪链球菌种水平荧光定量PCR检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
1）提取样品中的DNA；
2）以步骤1）中提取的DNA为模板，利用权利要求1所述引物对和探针进行荧光定量PCR扩增反应；
3）分析PCR产物。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，PCR反应体系以20μl计为：
7.根据权利要求5或6所述的方法，其特征在于，PCR反应条件为：95℃10秒；95℃5秒，60℃45秒，共40个循环。
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