[发明专利]一株产表面活性素和伊枯草菌素A类化合物的甲基营养型芽孢杆菌及其应用

权利要求书

1.甲基营养型芽孢杆菌（Bacillus methylotrophicus）SCSGAB0092，其保藏编号为：CCTCCNO：M 2012339。

2.一种表面活性素1-7、伊枯草菌素A类化合物8-11的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：表面活性素1-7的结构式如式（1）所示，伊枯草菌素A类化合物8-11的结构式如式（2）所示

表面活性素

1 R₁=C₁₀H₂₁,R₂=H,R₃=H,R₄=CH(CH₃)₂or

  R₁=C₉H₁₉,R₂=H,R₃=H,R₄=CH₂CH(CH₃)₂or CH(CH₃)CH₂CH₃

2 R₁=C₁₁H₂₃,R₂=H,R₃=H,R₄=CH(CH₃)₂or

  R₁=C₁₀H₂₁,R₂=H,R₃=H,R₄=CH₂CH(CH₃)₂or CH(CH₃)CH₂CH₃

3 R₁=C₁₂H₂₅,R₂=CH₃,R₃=H,R₄＝CH(CH₃)₂or

  R₁=C₁₁H₂₃,R₂=CH₃,R₃=H,R₄＝CH₂CH(CH₃)₂or CH(CH₃)CH₂CH₃

4 R₁=C₁₂H₂₅,R₂=H,R₃=H,R₄=CH(CH₃)₂or

  R₁=C₁₁H₂₃,R₂=H,R₃=H,R₄=CH₂CH(CH₃)₂or CH(CH₃)CH₂CH₃

5 R₁=C₁₂H₂₅,R₂=CH₃,R₃=H,R₄＝CH(CH₃)₂or

  R₁=C₁₁H₂₃,R₂=CH₃,R₃=H,R₄＝CH₂CH(CH₃)₂or CH(CH₃)CH₂CH₃

6 R₁=C₁₂H₂₅,R₂=CH₃,R₃=H,R₄＝CH(CH₃)₂or

  R₁=C₁₁H₂₃,R₂=CH₃,R₃=H,R₄＝CH₂CH(CH₃)₂or CH(CH₃)CH₂CH₃

7 R₁=C₁₂H₂₅,R₂=CH₃,R₃=CH₃,R₄=CH(CH₃)₂or

  R₁=C₁₁H₂₃,R₂=CH₃,R₃=CH₃,R₄=CH₂CH(CH₃)₂or CH(CH₃)CH₂CH₃

式（1）

式（2）

（a）制备权利要求1所述的甲基营养型芽孢杆菌SCSGAB0092CCTCC NO：M 2012339的发酵液；

（b）将步骤（a）得到的发酵液用乙酸乙酯萃取，浓缩得乙酸乙酯萃取物；

（c）将步骤（b）得到的乙酸乙酯萃取物用正相硅胶柱层析，以氯仿-甲醇作为洗脱剂，从体积比100:0到0:100进行梯度洗脱，收集氯仿-甲醇体积比为98：2洗脱下来的馏分Ⅴ，和收集体积比80：20到0：100洗脱下来的馏分Ⅷ；

馏分Ⅴ经反相硅胶柱层析，以甲醇-水为洗脱剂，从体积比30:70到100:0进行梯度洗脱，收集甲醇-水体积比100：0洗脱下来的馏分Ⅴ-4，再经HPLC纯化得到表面活性素单体化合物1-7；

馏分Ⅷ经凝胶柱层析，以氯仿-甲醇为洗脱剂，除去部分杂质后，再用反相硅胶柱层析，以甲醇-水为洗脱剂，从体积比50:50到100:0进行梯度洗脱，收集体积比70:30到100:0洗脱下来的馏分Ⅷ-2，再经HPLC纯化得到伊枯草菌素A类化合物8-11。