[发明专利]芋螺毒素多肽Eb1.6的制备方法有效
| 申请号： | 201210361425.6 | 申请日： | 2012-09-25 |
| 公开（公告）号： | CN102875654A | 公开（公告）日： | 2013-01-16 |
| 发明（设计）人： | 戴秋云;徐艳;董铭心;余硕;刘珠果;王孝花;周尚民;李海涛;代琴 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军军事医学科学院生物工程研究所 |
| 主分类号： | C07K7/08 | 分类号： | C07K7/08;C07K1/06;C07K1/04 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅 |
| 地址： | 100071 北京市丰台*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 毒素 多肽 eb1 制备 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种制备芋螺多肽Eb1.6的方法，包括如下步骤：1）采用缩合剂DIC/HOBt合成Eb1.6线性肽；2）折叠Eb1.6线性肽得到多肽粗品；3）纯化所述多肽粗品；即得到芋螺多肽Eb1.6。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：
所述采用缩合剂DIC/HOBt合成Eb1.6线性肽包括如下步骤：先用Fmoc保护氨基酸、以Rink树脂为固相载体、DIC/HOBt为缩合剂、哌啶为脱保护剂，从C端依次偶联合成，得到肽树脂；再将所述肽树脂裂解得到Eb1.6线性肽。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：
所述Rink树脂和每一个所述Fmoc保护氨基酸的摩尔比为1:4。
4.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：
所述折叠Eb1.6线性肽按照包括如下步骤的方法进行：
（a）将所述Eb1.6线性肽在浓度为0.1-0.3M、pH值为8.0-8.4的缓冲液中折叠；所述缓冲液为碳酸氢铵缓冲液或醋酸铵缓冲液或Tris缓冲液；
（b）将经步骤（a）得到的折叠产物经AmberliteXAD16大孔吸附树脂吸附后，用无水乙醇浸洗，收集浸洗产物，即得到多肽粗品。
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