[发明专利]一种检测微痕量克百威的方法

说明书

技术领域

本发明涉及化学农药的检测技术领域，尤其涉及氨基甲酸酯类农药中克百威检测方法，具体涉及一种检测微痕量克百威的方法。

 

背景技术

克百威属于氨基甲酸酯类农药，氨基甲酸酯类农药是常用的三大农药之一。该类农药常用来处理农作物的种子，可以有效的抑制多种害虫。

克百威属高毒杀虫剂，对眼睛和皮肤无刺激作用。在试验剂量内对动物无致畸、致突变、致癌作用，对鱼、鸟高毒，对蜜蜂无毒害。 但是由于克百威的高毒性和难降解等性质，其适当的用量和正确的使用方式直接影响其对作用的发挥及对人和环境的影响，在蔬菜、水果等直接食用的农作物上，国内外一般的做法都是对其使用量做了严格的限制；在其他农作物上比如水稻、棉花、烟草、大豆等作物上也限制了其用量。这主要是由于，克百威高毒性和难降解等性质，一旦用量超标就会导致农产品和土壤中产生大量的农药残留，从而对人体和生态环境带来不利的影响。因此，对克百威残留量简单、快速和灵敏的检测非常重要。

近年来对农药残留检测用的较多的是色谱法，包括气相色谱(GC)、气相色谱～质谱联用(GC～MS)，高效液相色谱(HPLC)等。这些方法灵敏度高，准确性好。但是由于这类检测手段需要大型的设备、专业的操作人员以及需要消耗大量的试剂，这使色谱法检测的成本非常高，从而限制了色谱法的广泛应用。

 

发明内容

针对现有技术存在的上述问题，本发明要解决的技术问题是：如何提供一种对植物中克百威残留量成本低廉，操作简单，且检测准确性高的检测方法。

解决该技术问题，本发明是这样实现的：一种检测微痕量克百威的方法，具体步骤如下：

一种检测微痕量克百威的方法，其特征在于：具体步骤如下,

步骤1：将面粉和蒸馏水以1:5的重量比进行混合得到面糊，对该面糊进行搅拌使面粉与水均匀混合，然后将所述面糊在4000r/min的离心速度之下离心10min，收集上清液，即得粗酶；

步骤2：取1mL步骤1中的粗酶，将该粗酶加入到27%PEG1000/13%NaH₂PO₄体系中，搅拌混合均匀，静置分相后，取出PEG相，将取出的PEG相加入到27%PEG1000/13%NaH₂PO₄/6%(NH₄)₂SO₄     体系中，搅拌混合均匀，静置分相后，对由磷酸二氢钠与硫酸铵组成的无机盐相进行透析、浓缩和冷冻干燥，得到纯化后的植物酯酶粉末，然后再将该植物酯酶粉末用蒸馏水溶解得到植物酯酶酶液；

步骤3：配制浓度为70～165μmol/L四苯基锌卟啉溶液，其中四苯基锌卟啉的粉末为溶质， N,N-二甲基甲酰胺为溶剂；

步骤4：将步骤2制备的植物酯酶酶液、步骤3制备的四苯基锌卟啉溶液及pH值为6.5～7.25的磷酸盐缓冲液均匀混合得到四苯基锌卟啉～植物酯酶复合溶液，其中植物酯酶酶液，四苯基锌卟啉溶液和pH值为6.5～7.25的磷酸盐缓冲液的体积比为1：0.5～2：48.5～47；

步骤5：使用紫外分光光度计检测步骤4中制得的四苯基锌卟啉～植物酯酶复合溶液对波长300nm～750nm的光波的吸收光谱曲线；

步骤6：将步骤2制备的植物酯酶酶液、步骤3制备的四苯基锌卟啉溶液和pH值为6.5～7.25的磷酸盐缓冲液均匀混合，再加入待测样品的N,N～二甲基甲酰胺清洗液，搅拌均匀混合后得到样品混合溶液，其中植物酯酶酶液，四苯基锌卟啉溶液，pH值为6.5～7.25的磷酸盐缓冲溶液和待测样品的N,N～二甲基甲酰胺清洗液的体积比为1：0.5～2：42～43.5：5；

步骤7：使用紫外分光光度计检测步骤6中制得样品混合溶液对波长300nm～750nm的光波的吸收光谱曲线；

步骤8：对步骤5测得的吸收光谱曲线与步骤7测得的吸收光谱曲线进行比较，如果两个光谱曲线完全相同，则待测样品的N,N～二甲基甲酰胺清洗液中不含有克百威或克百威的含量超出了本方法的检测限；如果两个光谱曲线不同，则待检测样品中含有克百威。