[发明专利]一种普萘洛尔药物对映体拆分方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从手性药物普萘洛尔对映体中拆分出左旋普萘洛尔和右旋普萘洛尔的方法。

背景技术

手性药物中不同对映体在体内显示出不同生物活性，这使得寻找高效、便捷的拆分方法显得尤为重要。普萘洛尔属于β-肾上腺阻滞剂类药物，临床上广泛用于治疗高血压，心肌缺血和心律不齐等疾病，其中S型普萘洛尔的药效大约是R型的40倍，且R型普萘洛尔还具有很强的抗生育作用。目前，拆分普萘洛尔对映体的方法主要有高效液相色谱法、毛细管电泳法、离子对色谱法、薄层色谱法等。

近十年来手性药物的开发倾向于发展单一对映体，单一对映体药物的世界市场每年以20%以上速度的增长。美国食品和药物管理局早在1992年就规定，今后凡开发具有不对称中心的药物，必须给出手性拆分的结果。因此，进行手性药物的拆分并获得单一的手性药物，已成为分离科学领域的一个重要分支。

高速逆流色谱技术(high-speed countercurrent chromatography，HSCCC)是20世纪80年代发展起来的一种不用固态支撑体或载体的液液分配技术，在分离过程中完全消除了气、液色谱中常见的不可逆吸附现象，不会破坏分子，适用于分离极性大的手性化合物以及生物大分子；由于它独特的分离机制，使其可用于制备分离，因此很适用于制备性分离手性化合物。近年来有关逆流色谱手性分离方面的研究有所加快。

发明内容

本发明的目的是提供一种采用高速逆流色谱技术拆分普萘洛尔药物对映体的方法。

为实现上述发明目的，本发明以盐酸普萘洛尔为拆分对象，先将普萘洛尔盐酸盐转化为普萘洛尔游离体，用L-酒石酸酯类和硼酸作为拆分试剂，L-酒石酸酯类添加到有机相中，硼酸添加到水相中，采用高速逆流色谱法得到左旋普萘洛尔和右旋普萘洛尔。

本发明采用的具体技术方案如下：

一种普萘洛尔药物对映体拆分方法，包括如下步骤：

（1）将含有L-酒石酸酯的有机溶剂和含有硼酸的醋酸/三乙胺缓冲液按照体积比1:1混合均匀，静置分层，分离得到有机相和水相；所述的有机溶剂为C1~C8的卤代烷烃、取代芳烃、C1~C8的烷烃或C2~C8的醚，所述的取代芳烃的取代基为一个或多个，所述取代基各自独立选自卤素或C1~C4的烷基，所述的有机溶剂中L-酒石酸酯的浓度为0.02~0.5mol/L；所述含有硼酸的醋酸/三乙胺缓冲液的pH在3.0~5.0，其中硼酸的浓度为0.02~0.30mol/L；

（2）将普萘洛尔盐酸盐转化为普萘洛尔游离体，并用步骤（1）所得水相溶解，制成样品待用，样品浓度为0.1~15.0mg/ml；

（3）采用高速逆流色谱法拆分普萘洛尔：分别以步骤（1）得到的有机相和水相为固定相和流动相，将逆流色谱分离柱填满固定相，柱温为5~30℃，开启速度控制器，转速为500~2000rpm，以0.2~3.0ml/min的流速将流动相泵入柱内，待两相溶剂体系达到流体动力学平衡后（当流动相从色谱柱出口处流出时就认为达到平衡），由进样阀进样，以波长190~400nm的紫外检测器检测，根据紫外检测谱图，分别收集前峰洗脱液和后峰洗脱液；

（4）分别从步骤（3）中收集得到的前峰洗脱液和后峰洗脱液中回收得到左旋普萘洛尔和右旋普萘洛尔的单体。

本发明所述的有机溶剂为C1~C8的卤代烷烃、取代芳烃、C1~C8的烷烃或C2~C8的醚，所述的C1~C8的卤代烷烃可以是氯仿、二氯甲烷等，所述的取代芳烃优选取代苯，例如甲苯、氯苯等，所述的C1~C8的烷烃可以是正己烷、正庚烷、正戊烷、环己烷、石油醚等，所述的C2~C8的醚可以是乙醚、甲基叔丁基醚等。优选的有机溶剂为氯仿或二氯甲烷，最优选的有机溶剂为氯仿。

本发明所述的L-酒石酸酯可以是L-酒石酸正己酯、L-酒石酸正丁酯、L-酒石酸正辛酯、L-酒石酸正戊酯、L-酒石酸异丁酯或L-酒石酸-2-乙基己酯。

本发明优选所述的含有硼酸的醋酸/三乙胺缓冲液的pH=4.0~4.4，其中硼酸浓度优选为0.05~0.1mol/L；最优选所述的含有硼酸的醋酸/三乙胺缓冲液的pH=4.4，其中硼酸浓度为0.1mol/L。

本发明优选所述的有机溶剂中L-酒石酸酯的浓度为0.1~0.2mol/L，最优选为0.1mol/L。