[发明专利]一株沙雷氏菌株及其处理土壤和果蔬表面杀扑磷农药残留的方法

说明书

技术领域

本发明属于环境微生物修复技术领域，具体涉及到沙雷氏菌株SPL-2及其处理土壤和果蔬表面杀扑磷农药残留的方法。

背景技术

农药为粮食的增产起到了重要的保障作用，也因此在世界各国的农业生产中被广泛使用。但是，农药的过分使用产生了严重的负面影响。农药残留很难降解，人们在使用农药防止病虫草害的同时，也使粮食、蔬菜、瓜果等农药残留超标，污染严重，同时给非靶生物带来伤害。在我国，影响蔬菜、水果等鲜食农产品质量安全诸多因素中，最突出的也正是农药残留超标，特别是禁限用高毒农药残留超标问题。近年来全国因误食有残留农药果蔬中毒案也屡屡发生，日益递增； 

研究表明，果蔬中残留农药在人体内长期蓄积滞留会引发慢性中毒，比急性中毒更为可怕，其主要是通过生物浓缩，果蔬残留两个方面的途径对人体健康带来威胁，以致诱发许多慢性疾病,如心脑血管病，糖尿病、肝病、癌症等。更让人难以始料和防范的是农药在人体内的蓄积，还会通过怀孕和哺乳传给下一代，殃及子孙后代的健康；

农药不合理的大量使用给人类及生态环境造成了越来越严重的不良后果，农药的污染问题已成为全球关注的热点。因此，加强农药的生物降解研究、解决农药对环境及食物的污染问题，是人类当前迫切需要解决的课题之一。农药残留广泛分布于土壤，水体，大气以及农产品中，难以利用大规模的工程措施消除污染，而控制农药污染源和开发去除农药新技术是解决农药残留的基本方法。自然界中，微生物可以对农药污染进行降解，这是依靠自然力量、同时不产生二次污染的最理想途径。因此利用微生物技术处理农药残留，并对受污染的果蔬与水体进行生物修复是一种行之有效的方法；

杀扑磷是一种广谱的有机磷杀虫剂，具有触杀、胃毒和渗透作用，能渗入植物组织内，对咀嚼式和刺吸式口器害虫均有杀灭效力，使用十分广泛。但也因其残留严重，并进入食物链，危害人类及其他动物健康，而受到广泛关注。 杀扑磷属高度毒性杀虫剂，能抑制人体胆碱酯酶活性，蓄积于神经系统后导致恶心、头晕、甚至神志不清，高浓度暴露可造成呼吸麻痹和死亡。因此，寻找一种去除环境中杀扑磷农药残留高效安全的方法成为关注的焦点，而利用杀扑磷高效降解菌剂应用于其污染环境的治理具有重要的现实意义和应用前景。

发明内容

本发明的目的是针对目前农业生产中农药残留污染的实际问题和需要，提供一种杀扑磷杀虫剂降解菌。本发明的另一目的是提供了使用杀扑磷降解菌制备油包水菌剂的方法，从而通过缓释作用缓慢维持菌种营养物质的供给，大大延长产品的保质期，使用本菌剂产品可以使田间杀扑磷残留量降低85%以上，且生产成本低廉，使用方便，具有广阔的市场前景。

技术方案

本发明提供一种杀扑磷降解菌，该菌株为革兰氏染色阴性的沙雷氏菌属（Serratia sp.），主要生物学特性为G-,兼性厌氧细菌，大小为0.7-0.9μm × 1.0-1.2μm，呈杆状，无芽孢，周生鞭毛有动力，单个或短链状排列。在LB固体培养基上培养18h后的菌落呈红色，凸状，不透明，湿润，不规则；能够利用葡萄糖、半乳糖、蔗糖、麦芽糖、山梨醇；能够还原硝酸盐；利用柠檬酸盐可使明胶水解；甲基红、氧化酶、苯丙氨酸反应实验呈阴性；VP反应、过氧化氢酶反应显阳性；三塘铁琼脂试验不产生硫化氢。该菌株16SrDNA的Genbank登录号为JN400353。该菌的最适生长pH为7.2-8.0，最适生长温度为37℃。该降解菌可以通过发酵工业通用发酵设备进行生产，成本低廉，菌剂直接喷洒使用方便，易于推广大规模应用；

使用上述杀扑磷降解菌生产菌剂产品的工艺流程为：斜面种→药瓶种子液→种子罐→发酵罐→菌剂产品；

本发明的详细实施步骤为：

（1）    挑取杀扑磷残留降解菌Serratia sp. SPL-2的单菌落接种于试管斜面；

（2）    将杀扑磷残留降解菌SPL-2的斜面种接种于LB培养基摇瓶中，振荡培养至对数生长期；

（3）    将上述培养好的菌液按15%体积接种量转入种子罐，继续培养至对数生长期；

（4）    将达到对数生长期的种子液按15%的接种量接入生产罐中培养；

（5）    发酵完成后将细菌培养液制成油包水剂型，并用塑料包装桶或包装瓶分装成液体剂型产品；

步骤2中所述LB培养基配方为：酵母膏5g/L，蛋白胨10g/L，NaCl 10g/L，pH：7.0-7.2；