[发明专利]重组链球菌溶血素O蛋白、核苷酸序列、制备方法及应用

权利要求书

1.一种重组链球菌溶血素O蛋白，其特征在于，所述蛋白的序列为将天然链球菌溶血素O蛋白的第530位半胱氨酸缺失，或突变为Xaa，且缺失天然链球菌溶血素O蛋白N端的77个氨基酸，所述Xaa选自Ala、Arg、Asn、Asp、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val；

优选的，Xaa为Ser、Thr或Ala；

更优选的，Xaa为Ala。

2.根据权利要求1所述的重组链球菌溶血素O蛋白，其特征在于，所述重组链球菌溶血素O蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO.2。

3.编码权利要求1或2所述的重组链球菌溶血素O蛋白的核苷酸序列。

4.根据权利要求3所述的核苷酸序列，其特征在于：

所述核苷酸序列为SEQ ID NO.1；或

所述核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示序列进行1个或几个核苷酸取代而得到的密码子同义突变的核苷酸序列。

5.一种抗原，其特征在于：所述抗原的氨基酸序列中包含：

权利要求1所述的重组链球菌溶血素O蛋白的氨基酸序列；或

SEQ ID NO.2所示序列。

6.一种载体，其特征在于，所述载体包含权利要求3或权利要求4所述的核苷酸序列；或

所述载体由权利要求3或权利要求4所述的核苷酸序列与表达载体经重组得到。

7.根据权利要求6的载体，其特征在于，所述表达载体为pET21W7或pEGFP_BMP7。

8.一种重组细胞，其特征在于，所述重组细胞包含：

权利要求3或权利要求4所述的核苷酸序列；或

权利要求6或7所述的载体。

9.根据权利要求8所述的重组细胞，其特征在于，所述重组细胞的宿主细胞为BL21(d3)-gold、HepG2、JM109或HB101。

10.制备权利要求1或2所述的重组链球菌溶血素O蛋白的方法，所述方法包括：

(1)合成权利要求3所述的核苷酸序列；

(2)将步骤(1)获得的核苷酸序列构建载体；

(3)将步骤(2)的载体转化宿主细胞获得重组细胞；

(4)培养并收集重组细胞，纯化提取重组链球菌溶血素O蛋白。

11.权利要求1或2所述的重组链球菌溶血素O蛋白，或权利要求3或4所述的核苷酸序列，或权利要求5所述的抗原在链球菌检测领域或抗链球菌溶血素O抗体检测领域中的应用。

12.一种抗链球菌溶血素O抗体检测试剂，其特征在于，所述试剂中含有：权利要求1或2所述重组链球菌溶血素O蛋白；或

权利要求5所述的抗原。

13.根据权利要求12的抗链球菌溶血素O抗体检测试剂，其特征在于，所述试剂中含有：权利要求1或2所述的重组链球菌溶血素O蛋白结合或偶联固相载体或信号分子；或

权利要求5所述的抗原结合或偶联固相载体或信号分子。