[发明专利]一种地沟油鉴定方法及其应用

权利要求书

1.一种地沟油鉴定方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

S1：对待检油样进行DNA富集提取；

S2：利用聚合酶链式反应扩增步骤S1中富集提取得到的DNA，得到待检油样的扩增DNA片段；

S3：以多个物种特异性看家基因片段为检测指标，判断所述待检油样的扩增DNA片段是否包含多个物种特异性看家基因片段的至少一个；其中，所述多个物种特异性看家基因片段为非油料植物物种特异性看家基因片段或动物特异性看家基因片段。

2.根据权利要求1所述的地沟油鉴定方法，其特征在于，在所述步骤S1中，采用核酸裂解液对所述待检油样进行DNA富集提取。

3.根据权利要求2所述的地沟油鉴定方法，其特征在于，所述采用核酸裂解液对所述待检油样进行DNA富集提取包括：按比例将所述核酸裂解液与所述待检油样混合，加热震荡，离心后弃油相，在水相中再次加入等量的所述待检油样，上述操作重复数次；保留最后一次离心后得到的水相，去除蛋白，加入核酸沉淀液，取DNA沉淀，加入核酸溶解液溶解所述DNA沉淀，制得DNA溶解液。

4.根据权利要求3所述的地沟油鉴定方法，其特征在于，在去除蛋白之前，将所述最后一次离心后得到的水相平均分装成多管；在加入核酸沉淀液之后，将得到的多管混合溶液转入同一沉淀管。

5.根据权利要求1所述的地沟油鉴定方法，其特征在于，在所述步骤S2中，所述聚合酶链式反应包括PCR和实时荧光PCR。

6.根据权利要求1所述的地沟油鉴定方法，其特征在于，在所述步骤S3中，所述动物特异性看家基因片段包括哺乳动物特异性看家基因片段、哺乳动物物种特异性看家基因片段和其他动物物种特异性看家基因片段。

7.根据权利要求6所述的地沟油鉴定方法，其特征在于，所述哺乳动物特异性看家基因片段为所有哺乳动物共有的基因片段；所述哺乳动物物种特异性看家基因片段包括猪物种特异性看家基因片段、牛物种特异性看家基因片段和羊物种特异性看家基因片段；所述其他动物物种特异性看家基因片段包括鸡物种特异性看家基因片段和鱼物种特异性看家基因片段。

8.根据权利要求1所述的地沟油鉴定方法，其特征在于，在所述步骤S3中，所述非油料植物物种特异性看家基因片段包括小麦物种特异性看家基因、大米物种特异性看家基因、马铃薯物种特异性看家基因、辣椒物种特异性看家基因和番茄物种特异性看家基因。

9.权利要求1-8的地沟油鉴定方法在鉴定地沟油方面的应用。