[发明专利]脂肪酸-RGD-脂肪醇偶联物介导表阿霉素靶向脂质体制备及抗肿瘤活性评价

说明书

技术领域

本发明涉及靶向释药载体，尤其涉及脂肪酸-RGD-脂肪醇介导靶向药物载体及其构建方法，本发明还涉及药物载体在制备靶向抗肿瘤药物脂质体中的应用，属于生物医药学领域。

背景技术

许多恶性肿瘤的生长和转移均与整合素表达异常或分子结构改变相关。整合素是一跨膜蛋白大家族，由α、β两种亚基构成异二聚体。目前发现α约有18种，β约有8种，至少有24种异二聚体的整合素形式。整合素在肿瘤的进展可能具有两重性：1)肿瘤发生早期，整合素表达降低可致瘤细胞与基底膜或ECM成分的粘附作用减弱，从而有利于肿瘤在局部生长与扩散；2)瘤细胞进入血循环后，整合素表达增高有利于瘤细胞粘附于血管内皮，继而定位增殖。整合素在肿瘤细胞表面的表达高于正常细胞是公认的事实。

已知，精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸三肽序列(Arg-Gly-Asp，RGD)是整合素特异识别序列片段，RGD三肽及修饰物通过与整合素特异结合，具有阻止肿瘤细胞定位增殖、抗肿瘤新生血管生成作用。

脂质体(liposome)是直径50～1000nm的球型脂质双层，磷脂膜的组成成分灵活，可以制成种类、大小、表面特征不同的多种类型，作为生物活性物质的有效运输载体。亲水性药物可以包容在脂质体的水核内，脂溶性药物可以嵌入磷脂双层间，中性药物可以通过调整脂质体内的pH值或通过添加反相离子与药物形成分子复合物而稳定地结合于脂质体内。

普通脂质体不具有靶向性。如在脂质体表面结合抗体、配体，利用肿瘤细胞与正常细胞表面表达的抗原受体的差异，通过抗原、抗体和受体、配体的特异性作用增加脂质体的主动靶向性，这样可以提高治疗指数。

抗肿瘤药物的主动靶向性制剂将是改进抗肿瘤药物制剂的新趋向。为了使载体系统具有特异靶向性，可将各种活性物质耦联到载体表面。借助这种特异性相互作用可将载有各种抗肿瘤药物的载体系统靶向到含有特异性受体的器官、组织或细胞；同时受体与配体结合可促进载体系统内药物释放到肿瘤细胞内。

发明内容

本发明涉及一种作为锚点化合物的偶联化合物，其化学式如下：CH₃(CH₂)nCO-Arg-Gly-Asp-OCH₂(CH₂)₁₀CH₃，其中，n＝4-16。

优选的偶联化合物，n＝6，8，10，12，14。

本发明还包括所述的作为锚点化合物的偶联化合物的方法，包括：将Arg-Gly-Asp与脂肪酸链进行缀合，再与十二醇进行缀合，即得。

本发明还涉及一种抗肿瘤药物靶向脂质体，含有所述的作为锚点化合物的偶联化合物。

进一步的，所述的抗肿瘤药物靶向脂质体，由以下各组分组成：抗肿瘤药物，磷脂，胆固醇和锚点化合物的偶联化合物。

进一步的，所述的抗肿瘤药物靶向脂质体，由以下组分制成，下述百分比均为质量百分比：抗肿瘤药物2-8％，磷脂70-80％，胆固醇10-20％和权利要求1或2所述的作为锚点化合物的偶联化合物为3-10％。

进一步的，抗肿瘤药物为：表阿霉素，阿霉素，吡喃阿霉素，紫杉醇，多西紫杉醇，柔红霉素阿克拉霉素、光辉霉素中的一种或多种。

进一步的，磷脂为：卵磷脂，大豆磷脂，二棕榈酰磷脂酰胆碱，二硬脂酰磷脂酰胆碱中的一种或多种。

本发明涉及一种制备上述抗肿瘤药物靶向脂质体的方法，包括：将除抗肿瘤药物之外的其他各组分用氯仿溶解，旋转蒸发去除溶剂，加入150mmol·L^-1(NH₄)₂SO₄溶液，超声分散，得空白脂质体混悬液。将空白脂质体置透析袋中透析4-5次，每次透析约10h，取出透析内液置于茄瓶中；另精密称取抗肿瘤药物适量，溶于水中，将此溶液加入至空白脂质体混悬液，混匀，于热水浴中放置，振摇，即得。

本发明涉及所述的具有两亲性的脂肪酸-RGD-脂肪醇缀合物在制备抗肿瘤靶向脂质体药物中的应用。

本发明涉及所述的靶向脂质体等各种药物载体在制备治疗肿瘤的药物中的用途。

本发明涉及以腹水瘤S180小鼠为模型，采用尾静脉给药的治疗方案评价所述的抗肿瘤靶向脂质体制剂的抗肿瘤活性，结果显示靶向脂质体比各对照组具有更优异的抗肿瘤活性。

本发明涉及以肝癌细胞HepG2为模型，采用MTT法评价所述的抗肿瘤靶向脂质体制剂的抗肿瘤活性，结果显示靶向脂质体比各对照组具有更优异的抗肿瘤活性。