[发明专利]皮肤或毛发结合肽

说明书

本申请是申请日为2003年11月12日、申请号为200380104000.6、发明名称为“皮肤或毛发结合肽”的发明专利申请的分案申请。

发明背景

使用相似化合物文库的多种方法可用于选择和鉴定能够在非期望背景靶标(抗-靶标)的存在下与靶标特异性结合的化合物。本发明涉及在抗靶标(anti-target)存在下与靶标例如皮肤或毛发(hair)特异性结合的肽。当靶标是皮肤时，毛发是抗靶标，而当毛发是靶标时，皮肤是抗靶标。

文献中有充分的用于筛选化合物特别是肽大文库的方法的近期进展实例。筛选这些化合物以鉴定结合预选靶标的分子的方法也得到提高。一个众所周知的方法是生物淘选(biopanning)，该方法最初由Smith，G.P.，(1985)，Science 228：1315发展。最简单形式的生物淘选是体外选择过程，在该过程中，将噬菌体展示肽文库与靶标孵育。允许靶标和噬菌体结合，并清洗掉未结合的噬菌体。然后酸洗脱特异性结合的噬菌体。体内扩增洗脱的噬菌体，并重复该过程。许多循环后，分离单个克隆并测序。

由Smith首先介绍的生物淘选技术的许多变化得到说明，参考文献为Christian等人，(1992)J.Mol.Biol.，227：711；Cwirla等人，(1990)Proc.Natl.Acad.Sci.USA，87：6378；Cull等人，(1992)Proc.Natl.Acad.Sci.USA，89：1865；Huls等人，(1996)Nature Biotechnol.，7：276；以及Bartoli等人，(1998)Nature Biotechnol.，16：1068。

Huls等人，1996(同上)描述了以流式细胞仪为基础的完整肿瘤细胞上的噬菌体抗体的扣除选择(subtractive selection)方法。在流式细胞术选择过程中，噬菌体展示的抗体与靶标保持结合。然而，在扩增前，将与细胞结合的噬菌体从靶标上洗脱。WO 98/54312公开了在对抗原具有高亲合力的温和条件下，使用在线粒体上展示的抗体文库对抗体的选择。

Balass等人(1996)Anal.Biochem.，243：264，描述了使用固定在硝酸链霉亲和素(nitrostreptavidin)基质上的生物素化靶标从噬菌体-肽文库选择高亲合力噬菌体-肽。其他标定(targeting)方法包括，例如，SELEX(U.S.Patent No.5,475,096)和选择性标定，选择性标定包括如WO 01/79479中所说明的去选择方法。

发明概述

第一方面，本发明涉及与皮肤结合但是不与毛发结合的肽，第二方面，本发明涉及与毛发结合但是不与皮肤结合的肽。

第三方面，本发明涉及皮肤结合肽，包括：(a)SEQ ID No.1-24中任何一个或(b)与SEQ ID No.1-24中任何一个序列具有至少50％序列一致性并包括序列簇(sequence cluster)的氨基酸序列，所述序列簇选自APQQRPMXTXXX(SEQ ID NO.25)；PPWXXXL(SEQ ID NO.26)；XXTXLTS(SEQ ID NO.27)；XPPLLXL(SEQ ID NO.28)；SXPSGAX(SEQ ID NO.29)；XQATFXXNXXXX(SEQ ID NO.30)；VXTSQLXXXXXX(SEQ ID NO.31)；LXXXRMK(SEQ ID NO.32)和HXXXYLT(SEQ ID NO.33)，其中X代表任何L-氨基酸。

在一个实施方案中，本发明的皮肤结合肽包括C-C衍生物。本发明特别优选的皮肤结合肽包括具有SEQ ID NO.1氨基酸序列的肽；包括序列为XQATFXXNXXXX(SEQ ID NO.30)的序列簇的肽；具有SEQ ID NO.5氨基酸序列的肽；具有序列为LXXXRMK(SEQ ID NO.32)的序列簇的肽，以及具有APQQRPMXTXXX(SEQ ID NO.25)序列簇的肽。在另一个实施方案中，本发明涉及包含一个或多个在此公开的皮肤结合肽的组合物。